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绵羊是我国重要的畜牧业生产动物之一,其繁殖效益直接影响着畜牧业的发展。而绵羊早期胎儿性别鉴定技术的应用,可以帮助畜牧业生产者更好地进行繁殖管理,提高繁殖效益。传统的绵羊胎儿性别鉴定方法主要是通过超声波检查或者解剖检查,这些方法不仅操作复杂,而且对母羊和胎儿都有一定的伤害。而应用母体外周血中游离DNA鉴定绵羊早期胎儿性别技术,不仅操作简单,而且无创伤,因此备受畜牧业生产者的青睐。
本标准规定了应用母体外周血中游离DNA鉴定绵羊早期胎儿性别的技术要求、方法、步骤、结果判定及报告要求。具体内容如下:
1. 技术要求
(1)母羊妊娠时间在60天以上;
(2)母羊外周血采集后,应在4小时内进行DNA提取;
(3)DNA提取后,应在1个月内进行PCR扩增;
(4)PCR扩增后,应在1个月内进行性别鉴定。
2. 方法
(1)采集母羊外周血样本;
(2)提取游离DNA;
(3)进行PCR扩增;
(4)进行性别鉴定。
3. 步骤
(1)采集母羊外周血样本;
(2)提取游离DNA;
(3)进行PCR扩增;
(4)进行性别鉴定;
(5)结果判定;
(6)报告结果。
4. 结果判定
(1)PCR扩增结果为单一条带,且大小符合预期,判定为成功;
(2)PCR扩增结果为多条带或无条带,判定为失败;
(3)性别鉴定结果为Y染色体,判定为雄性;
(4)性别鉴定结果为X染色体,判定为雌性。
5. 报告要求
(1)报告应包括母羊编号、采样日期、PCR扩增结果、性别鉴定结果等信息;
(2)报告应由专业人员签字确认。
相关标准:
GB/T 23200-2009 母体外周血中游离DNA提取试剂盒
GB/T 23201-2009 母体外周血中游离DNA提取试剂盒使用说明
GB/T 23202-2009 母体外周血中游离DNA提取试剂盒质量控制
GB/T 23203-2009 母体外周血中游离DNA提取试剂盒检验规范
GB/T 23204-2009 母体外周血中游离DNA提取试剂盒标志、包装、运输和贮存