DB64/T 1009-2014
宁夏水稻品种真实性鉴定 SSR标记法
发布时间:2014-10-15 实施时间:2014-10-15
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宁夏是我国重要的水稻种植区之一,水稻品种的真实性鉴定对于保障农民的利益、促进水稻产业的发展具有重要意义。本标准旨在规范宁夏水稻品种真实性鉴定的SSR标记法,确保鉴定结果准确可靠。
1. 适用范围
本标准适用于宁夏水稻品种真实性鉴定的SSR标记法。
2. 样品的采集
2.1 样品的选择
选择生长健壮、无病虫害的水稻植株,采取新鲜叶片作为样品。
2.2 样品的采集
在样品采集前,用95%乙醇消毒剪刀和手套。采集样品时,将叶片放入2mL离心管中,标注好样品编号和采集日期,并在-80℃冷冻保存。
3. DNA的提取
3.1 样品的处理
将样品从-80℃取出,立即加入液氮中快速研磨成粉末状,加入提取液中,混匀后放置于65℃水浴中静置30min。
3.2 DNA的纯化
将提取液离心,取上清液加入等体积的氯仿-异戊酸酯混合液,混匀后离心,取上清液加入等体积的冷乙醇,混匀后放置于-20℃冷冻箱中沉淀DNA,离心后去除上清液,用70%乙醇洗涤沉淀,最后用TE缓冲液溶解DNA。
4. PCR扩增
4.1 引物的设计
选择适当的引物,设计PCR反应体系。
4.2 PCR反应
将DNA模板加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。
5. 电泳分离和数据分析
将PCR产物进行电泳分离,根据电泳图谱进行数据分析,判断水稻品种的真实性。
相关标准:
GB/T 20481-2006 水稻品种纯度检验方法
GB/T 20482-2006 水稻品种真实性检验方法
GB/T 20483-2006 水稻品种同工酶鉴定方法
GB/T 20484-2006 水稻品种DNA指纹图谱构建方法
GB/T 20485-2006 水稻品种遗传多样性评价方法