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马铃薯是一种重要的蔬菜作物,其中含有一些生物碱,如龙葵素(α-茄碱及α-卡茄碱)。这些生物碱对人体有一定的毒性,因此需要对马铃薯中的龙葵素含量进行测定。本标准采用高效液相色谱法进行测定,具有准确、快速、灵敏等特点。
1. 原理
样品经过提取、过滤、稀释后,采用高效液相色谱法进行分析。样品中的龙葵素在特定条件下与柱填料发生相互作用,分离出来后通过紫外检测器进行检测,得到龙葵素的峰面积。通过对标准品的测定,建立标准曲线,计算出样品中龙葵素的含量。
2. 仪器和设备
(1)高效液相色谱仪
(2)紫外检测器
(3)色谱柱
(4)移液器、量筒、瓶塞等实验室常用器材
3. 试剂和材料
(1)甲醇
(2)乙腈
(3)水
(4)马铃薯样品
(5)标准品
4. 操作步骤
(1)样品制备:将马铃薯样品去皮、切碎,加入甲醇进行提取,过滤后稀释至适当浓度。
(2)标准品制备:将标准品加入甲醇中进行稀释,得到一系列不同浓度的标准品溶液。
(3)色谱条件设置:设置色谱柱、流速、检测波长等参数。
(4)样品进样:将样品注入色谱柱中进行分离。
(5)数据处理:通过标准曲线计算出样品中龙葵素的含量。
5. 结果计算
样品中龙葵素的含量计算公式为:C = (A-B)/a,其中C为样品中龙葵素的含量,A为样品的峰面积,B为空白的峰面积,a为标准曲线的斜率。
相关标准:
1. GB/T 5009.124-2017 食品中龙葵素的测定 高效液相色谱法
2. GB/T 5009.125-2017 食品中茄碱的测定 高效液相色谱法
3. GB/T 5009.126-2017 食品中卡茄碱的测定 高效液相色谱法
4. GB/T 5009.227-2016 食品中生物碱的测定 高效液相色谱法
5. GB/T 22388-2008 马铃薯品种分类标准