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唐古特白刺是一种珍贵的中药材,具有多种药理活性成分,广泛应用于中医药领域。为了满足唐古特白刺的研究和应用需求,需要对其进行组织培养,以提高其产量和品质。本标准制定了唐古特白刺组织培养的技术规程,具体内容如下:
1.适宜材料的选择
唐古特白刺的茎、叶、根等部位均可用于组织培养,但以茎段为宜。茎段应选取生长健壮、无病虫害的植株,切割时应注意消毒。
2.培养基的配制
唐古特白刺的培养基应根据不同的培养阶段进行配制,具体配方如下:
(1)愈伤组织诱导培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+Sucrose 30 g/L+Agar 7 g/L+水分调节至pH 5.8-6.0;
(2)愈伤组织增殖培养基:MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+Sucrose 30 g/L+Agar 7 g/L+水分调节至pH 5.8-6.0;
(3)愈伤组织分化培养基:MS+NAA 0.5 mg/L+Sucrose 30 g/L+Agar 7 g/L+水分调节至pH 5.8-6.0。
3.组织培养的操作步骤
(1)茎段的消毒:将茎段在70%的乙醇中浸泡1-2min,再在含0.1%的污染物的漂白粉溶液中浸泡15-20min,最后用无菌蒸馏水冲洗3-4次;
(2)愈伤组织诱导:将消毒后的茎段切成0.5-1.0cm的段,接种在愈伤组织诱导培养基上,放置于25℃、光照强度为2000 lx的培养箱中;
(3)愈伤组织增殖:将诱导成功的愈伤组织转移到愈伤组织增殖培养基上,放置于25℃、光照强度为2000 lx的培养箱中;
(4)愈伤组织分化:将增殖成功的愈伤组织转移到愈伤组织分化培养基上,放置于25℃、光照强度为2000 lx的培养箱中。
4.质量控制和检验方法
(1)愈伤组织的生长情况:观察愈伤组织的生长情况,如愈伤组织的生长速度、颜色、质地等;
(2)愈伤组织的分化情况:观察愈伤组织的分化情况,如愈伤组织的分化率、分化方向、分化形态等;
(3)愈伤组织的细胞学特征:通过显微镜观察愈伤组织的细胞学特征,如细胞形态、细胞核形态等。
相关标准:
GB/T 5009.3-2016 食品中灰分的测定
GB/T 5009.4-2016 食品中粗脂肪的测定
GB/T 5009.5-2016 食品中粗蛋白的测定
GB/T 5009.6-2016 食品中水分的测定
GB/T 5009.7-2016 食品中灰分的测定