春小麦是我国主要的粮食作物之一,其育种研究对于提高我国粮食生产水平具有重要意义。花药培养技术是春小麦育种研究中的重要手段之一,可以通过花药培养获得大量的单倍体植株,为春小麦的遗传改良提供了便利。
本标准规定了春小麦花药培养的技术要求、操作步骤、培养基配方、培养条件、观察指标、结果判定等内容,旨在规范春小麦花药培养技术的操作流程,提高春小麦花药培养的成功率和效率。
1 技术要求
1.1 选用健康、生长良好的春小麦花序,花药发育成熟,色泽黄绿,未开裂。
1.2 选用无菌操作室进行花药培养,保证操作环境的无菌。
1.3 选用高质量的培养基原料,保证培养基的质量。
1.4 操作人员应具备一定的细胞培养技术和无菌操作技能。
2 操作步骤
2.1 准备工作
2.1.1 准备无菌操作室,消毒操作台、培养箱、培养器等设备。
2.1.2 准备所需的培养基原料和试剂。
2.1.3 准备春小麦花序,进行表面消毒处理。
2.2 花药分离
2.2.1 将春小麦花序放入无菌操作室,用无菌镊子将花药分离出来。
2.2.2 将花药放入含有生长调节剂的培养基中。
2.3 培养
2.3.1 将含有花药的培养基培养在适宜的温度、光照和湿度条件下。
2.3.2 观察花药的生长情况,记录生长指标。
2.4 结果判定
2.4.1 根据观察指标,判断花药培养的成功率和效果。
2.4.2 对于成功的花药,进行单倍体植株的培养和筛选。
3 培养基配方
3.1 基本培养基
3.1.1 MS培养基
3.1.2 B5培养基
3.2 生长调节剂
3.2.1 2,4-D
3.2.2 NAA
3.2.3 KT
3.2.4 BA
4 培养条件
4.1 温度:20-25℃
4.2 光照:光照强度为2000-3000lx,光周期为16h/8h(光/暗)
4.3 湿度:相对湿度为60%-70%
5 观察指标
5.1 花药的生长情况
5.2 花药的发育情况
5.3 花药的分化情况
相关标准
GB/T 16157-2012 植物组织培养技术术语
GB/T 16158-2012 植物组织培养基质
GB/T 16159-2012 植物组织培养基配方
GB/T 16160-2012 植物组织培养条件
GB/T 16161-2012 植物组织培养观察指标