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草地是人类重要的生态系统之一,草地植物的品种真实性对于草地的生态建设和经济利用具有重要意义。为了保证草地植物品种的真实性,需要对草种材料进行真实性检验。本标准介绍了利用SSR标记法进行草品种真实性检验的方法和要求。
一、适用范围
本标准适用于草种子、草种苗、草种植株等草种材料的真实性检验。
二、检验原理
SSR标记法是一种基于PCR扩增技术的分子标记方法,利用多态性SSR位点的特异性扩增,可以对不同草品种进行鉴定。该方法具有高度的重复性和稳定性,可以有效地检测草品种的真实性。
三、检验方法
1. 样品准备
样品应选择具有代表性的草种材料,如草种子、草种苗、草种植株等。样品应保持完整,避免受到污染和损伤。
2. DNA提取
采用适当的DNA提取方法,从样品中提取出高质量的DNA。提取的DNA应具有高纯度和高浓度,以保证PCR扩增的效果。
3. SSR扩增
根据草品种的特征,选择适当的SSR引物对样品进行扩增。PCR反应体系和条件应根据引物的特性进行优化,以保证扩增效果。
4. PCR产物分析
将PCR产物进行电泳分析,根据PCR产物的大小和数量,判断草品种的真实性。同时,应设置对照品种,以保证检验结果的准确性。
四、结果判定
根据PCR产物的大小和数量,结合对照品种的结果,判断草品种的真实性。如果PCR产物的大小和数量与对照品种一致,则判定该草品种为真实品种;如果PCR产物的大小和数量与对照品种不一致,则判定该草品种为非真实品种。
五、质量控制
1. 样品的选择和处理应符合实验要求,避免样品受到污染和损伤。
2. DNA提取和PCR扩增应严格按照方法要求进行,以保证实验结果的准确性和可靠性。
3. 实验过程中应设置对照品种,以保证检验结果的准确性。
相关标准:
GB/T 17215-2002 草种子品种纯度检验方法
GB/T 17216-2002 草种子品种杂质检验方法
GB/T 17217-2002 草种子品种活力检验方法
GB/T 17218-2002 草种子品种萌发力检验方法
GB/T 17219-2002 草种子品种纯度、杂质、活力和萌发力综合检验方法