DB61/T 1138-2018
水质 粪大肠菌群的测定 酶底物法
发布时间:2018-04-12 实施时间:2018-05-12


粪大肠菌群是一类常见的肠道细菌,其存在于水体中通常是由于粪便污染所致。因此,粪大肠菌群的测定是水质监测中的重要指标之一。本标准采用酶底物法进行测定,具体方法如下:

1. 原理
粪大肠菌群的测定采用β-半乳糖苷酶底物法,通过检测水样中的β-半乳糖苷酶活性来间接测定粪大肠菌群的数量。

2. 试剂和仪器
(1)β-半乳糖苷酶底物液
(2)4-氨基安替比林(4-Methylumbelliferyl-β-D-glucuronide)标准品
(3)0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8)
(4)0.1mol/L氢氧化钠溶液
(5)0.1mol/L盐酸溶液
(6)紫外分光光度计

3. 操作步骤
(1)取适量水样,加入β-半乳糖苷酶底物液,混匀后放置于37℃恒温水浴中反应30分钟。
(2)加入4-Methylumbelliferyl-β-D-glucuronide标准品,混匀后放置于37℃恒温水浴中反应30分钟。
(3)加入0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH6.8),混匀后测定样品和标准品的荧光强度。
(4)计算样品中粪大肠菌群的数量。

4. 结果计算
(1)计算标准品的荧光强度,绘制标准曲线。
(2)计算样品的荧光强度,根据标准曲线计算出样品中粪大肠菌群的数量。

相关标准
GB/T 5750-2018 水质标准
GB/T 17219-1998 水质样品的采集
GB/T 5751-2006 水质样品的处理