猕猴桃花粉溃疡病是由猕猴桃花粉溃疡病菌引起的一种病害，严重影响了猕猴桃的产量和质量。为了及时发现和控制病害的传播，需要对猕猴桃花粉溃疡病菌进行检测。本标准针对猕猴桃花粉溃疡病菌活菌检测，制定了以下技术要求、方法和步骤。

1. 技术要求
1.1 检测方法应具有高灵敏度和高特异性，能够准确检测猕猴桃花粉溃疡病菌的活菌。
1.2 检测方法应简便、快速、可靠，适用于大规模检测。
1.3 检测方法应具有较好的重复性和稳定性，能够保证检测结果的准确性和可靠性。

2. 检测方法
2.1 样品处理
将待检样品（如猕猴桃花粉、花粉粉末等）加入适量的生理盐水中，振荡混合均匀，制备成10-1、10-2、10-3等不同浓度的悬浮液。
2.2 菌种接种
将猕猴桃花粉溃疡病菌接种于含有适宜营养物质的培养基中，培养至对数生长期，制备成10-1、10-2、10-3等不同浓度的菌液。
2.3 检测步骤
2.3.1 取10μL不同浓度的菌液加入96孔板中，每个浓度设置3个孔位，作为阳性对照。
2.3.2 取10μL不同浓度的样品悬浮液加入96孔板中，每个浓度设置3个孔位，作为待检样品。
2.3.3 取10μL生理盐水加入96孔板中，每个浓度设置3个孔位，作为阴性对照。
2.3.4 将96孔板密封，放置于恒温培养箱中，温度为28℃，培养时间为24小时。
2.3.5 培养结束后，观察96孔板中各孔位的生长情况，记录阳性对照、待检样品和阴性对照的结果。

3. 结果判定
3.1 阳性对照：菌液浓度为10-1、10-2、10-3的孔位均有菌落生长。
3.2 待检样品：若待检样品中存在猕猴桃花粉溃疡病菌，则其对应的孔位会出现菌落生长。
3.3 阴性对照：生理盐水对应的孔位无菌落生长。
3.4 结果判定应根据阳性对照、待检样品和阴性对照的结果进行比对，确定待检样品中是否存在猕猴桃花粉溃疡病菌。

相关标准
GB/T 23538-2009 猕猴桃花粉溃疡病菌检疫鉴定方法
GB/T 23539-2009 猕猴桃花粉溃疡病菌检测方法
GB/T 23540-2009 猕猴桃花粉溃疡病菌检测试剂盒
GB/T 23541-2009 猕猴桃花粉溃疡病菌检测质量控制
GB/T 23542-2009 猕猴桃花粉溃疡病菌检测结果判定