DB53/T 405-2012
花卉病害 菜豆黄花叶病毒的检测
发布时间:2012-05-25 实施时间:2012-07-01


花卉病害是指影响花卉生长和品质的病害。其中,菜豆黄花叶病毒是一种常见的病毒,能够感染多种花卉,如菊花、康乃馨、郁金香等。该病毒会导致花卉叶片变黄、变形、萎缩等症状,影响花卉的观赏价值和市场价值。因此,对于花卉生产和贸易来说,菜豆黄花叶病毒的检测非常重要。

本标准提供了两种检测方法:PCR和ELISA。PCR是一种基于DNA扩增的检测方法,能够快速、准确地检测出菜豆黄花叶病毒的存在。ELISA是一种基于抗原-抗体反应的检测方法,同样能够快速、准确地检测出菜豆黄花叶病毒的存在。两种方法各有优缺点,具体选择哪种方法应根据实际情况而定。

下面分别介绍两种检测方法的具体步骤:

1. PCR检测方法

1.1 样品处理

将待检测的花卉叶片样品取出,用无菌水或PBS缓冲液清洗干净,然后将样品切碎,加入适量的提取液,混合均匀。

1.2 DNA提取

将样品和提取液混合物离心,取上清液,加入等体积的异丙醇,混合均匀,离心沉淀。将沉淀洗涤干净,加入适量的TE缓冲液,混合均匀,离心沉淀。最后将沉淀溶解在适量的水中,即得到DNA提取物。

1.3 PCR扩增

将DNA提取物加入PCR反应体系中,进行PCR扩增。PCR反应体系的具体组成和反应条件应根据实际情况而定。扩增结束后,将PCR产物进行凝胶电泳,观察是否存在目标条带。

2. ELISA检测方法

2.1 样品处理

将待检测的花卉叶片样品取出,用无菌水或PBS缓冲液清洗干净,然后将样品切碎,加入适量的提取液,混合均匀。

2.2 抗原提取

将样品和提取液混合物离心,取上清液,加入适量的抗原提取液,混合均匀,离心沉淀。将沉淀洗涤干净,加入适量的ELISA板涂层缓冲液,混合均匀,将混合物加入ELISA板中,孵育一定时间。

2.3 抗体检测

将待检测的ELISA板加入适量的抗体,孵育一定时间,然后加入底物,观察是否出现颜色反应。颜色反应的强度与样品中菜豆黄花叶病毒的含量成正比。

相关标准
GB/T 18779-2002 花卉检疫规程
GB/T 18780-2002 花卉检疫标准
GB/T 18781-2002 花卉检疫方法
GB/T 18782-2002 花卉检疫证书
GB/T 18783-2002 花卉检疫标志