：
烟草疫霉是一种常见的烟草病害，对烟草生产造成了很大的危害。土壤是烟草疫霉的重要传播途径，因此对土壤中的烟草疫霉带菌情况进行定量检测具有重要意义。本标准旨在规范烟草疫霉土壤带菌定量技术，提高检测结果的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于烟草疫霉土壤带菌定量检测。

2.术语和定义
2.1 烟草疫霉：烟草病害之一，由烟草疫霉菌引起。
2.2 土壤带菌：指土壤中存在烟草疫霉菌。
2.3 定量检测：对样品中烟草疫霉菌数量进行测定。

3.要求
3.1 仪器设备：应选用符合国家标准的仪器设备进行检测。
3.2 试剂：应选用符合国家标准的试剂进行检测。
3.3 检测人员：应具有相关专业知识和技能，熟练掌握检测方法和操作技能。
3.4 检测环境：应保持检测环境干净、整洁、无污染。

4.方法
4.1 样品采集：应按照规定采集土壤样品。
4.2 样品处理：应按照规定对土壤样品进行处理。
4.3 DNA提取：应按照规定对样品中的DNA进行提取。
4.4 PCR扩增：应按照规定进行PCR扩增。
4.5 检测结果：应按照规定对PCR扩增产物进行检测。
4.6 结果计算：应按照规定对检测结果进行计算。

5.结果计算
5.1 样品中烟草疫霉菌数量的计算公式为：N = (Ct - b) / k
其中，N为烟草疫霉菌数量，Ct为PCR扩增曲线的阈值周期数，b为负对照的阈值周期数，k为样品中DNA的体积。
5.2 结果应按照规定进行报告编制。

相关标准：
GB/T 23538-2009 烟草疫霉检疫鉴定方法
GB/T 23539-2009 烟草疫霉检疫处理方法
GB/T 23540-2009 烟草疫霉检疫标准规范
GB/T 23541-2009 烟草疫霉检疫术语
GB/T 23542-2009 烟草疫霉检疫分类