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一、范围
本标准适用于肥料中腐植酸含量的测定，适用于有机肥料、复合肥料、生物有机肥料等。

二、引用标准
GB/T 601-2002 肥料化学分析方法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范与评价

三、试剂和仪器
1. 重铬酸钾（K2Cr2O7）：纯度为AR级。
2. 硫酸（H2SO4）：纯度为AR级。
3. 氯仿（CHCl3）：纯度为AR级。
4. 氢氧化钠（NaOH）：纯度为AR级。
5. 氢氯酸（HCl）：纯度为AR级。
6. 水：蒸馏水或去离子水。
7. 仪器：分析天平、电热板、恒温水浴器、紫外分光光度计。

四、样品的制备
将样品研磨成粉末状，过筛后取适量样品，称重。

五、操作步骤
1. 取样品0.5g，加入100ml锥形瓶中，加入10ml浓硫酸，加热至沸腾，继续加热2h，冷却至室温。
2. 加入10ml氯仿，振荡1min，放置分层，取上层液，加入10ml氯仿，振荡1min，放置分层，取上层液，重复此操作3次。
3. 将上层液转移至250ml容量瓶中，加入50ml蒸馏水，加入5ml氢氧化钠溶液，用0.1mol/L的HCl溶液滴定至pH=1.0左右。
4. 加入10ml重铬酸钾溶液，加热至沸腾，继续加热10min，冷却至室温。
5. 加入50ml蒸馏水，用0.1mol/L的HCl溶液滴定至蓝色消失，加入1ml氯仿，振荡1min，放置分层，取上层液，用紫外分光光度计测定吸光度值A。
6. 用蒸馏水代替样品，按上述方法操作，得到空白吸光度值A0。
7. 计算腐植酸含量（以干基计算）：C=（A-A0）×V×F/m，其中C为腐植酸含量，mg/g；A为样品吸光度值；A0为空白吸光度值；V为稀释倍数，V=250/100=2.5；F为腐植酸摩尔吸光系数，F=1.0；m为样品质量，g。

六、结果的计算和表示
结果应取样品测定值的平均数，保留两位小数。结果应以干基计算，单位为mg/g。

七、注意事项
1. 操作过程中应注意安全，避免接触皮肤和吸入气体。
2. 操作过程中应注意仪器的准确性和精度。
3. 操作过程中应注意样品的准确性和精度。
4. 操作过程中应注意试剂的纯度和质量。
5. 操作过程中应注意环境的卫生和清洁。

相关标准：
GB/T 601-2002 肥料化学分析方法
GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范与评价
GB/T 12496-1999 肥料中有机质含量的测定
GB/T 23347-2009 生物有机肥料
GB/T 23348-2009 有机无机复合肥料