DB51/T 1539-2012
油菜根肿病菌土壤带菌PCR检测技术规程
发布时间:2012-12-20 实施时间:2013-03-01


油菜根肿病是由油菜根肿病菌引起的一种病害,严重影响油菜的生长和产量。为了及时、准确地检测油菜根肿病菌的存在,保障油菜的生产安全,制定了本标准。

1. 要求
1.1 仪器设备:PCR仪、电泳仪、显微镜等。
1.2 试剂:PCR试剂盒、琼脂糖、DNA标记物等。
1.3 样品:土壤样品。

2. 方法
2.1 样品处理
取样时应避免污染,样品应在采集后24小时内进行检测。样品处理前应先将土壤中的杂质去除,然后将土壤样品加入离心管中,加入适量的PBS缓冲液,振荡混合后离心,取上清液作为检测样品。
2.2 DNA提取
将上清液加入离心管中,加入适量的提取液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的异丙醇,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的离心管中,加入适量的洗涤液,振荡混合后离心,取上清液加入新的