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大熊猫是我国珍稀保护动物之一，其疾病防控工作十分重要。犬冠状病毒是一种常见的病原体，可引起犬、猫等动物的呼吸道和肠道疾病。近年来，犬冠状病毒也被发现可以感染大熊猫，因此对大熊猫进行犬冠状病毒检测具有重要意义。

本标准规定了大熊猫犬冠状病毒实验室检测的RT-PCR方法，具体内容如下：

1.样品采集
样品采集应在动物临床症状出现后的48小时内进行，采集的样品包括熊猫鼻咽部分泌物、粪便等。采集时应注意避免污染，采集后应立即送至实验室进行处理。

2.核酸提取
样品处理前应进行消毒处理，然后进行核酸提取。核酸提取方法应选择适合样品类型的方法，提取后应进行纯化处理，以保证提取的核酸质量。

3.RT-PCR反应体系
RT-PCR反应体系应包括反转录酶、PCR引物、荧光探针等，具体反应体系应根据实验室条件和试剂盒选择进行调整。

4.PCR程序
PCR程序应根据试剂盒说明书进行设置，包括反转录、预变性、PCR扩增等步骤。PCR程序应进行验证，以保证反应的准确性和可靠性。

5.结果判定
PCR结果应根据荧光信号强度和阈值周期数进行判定，同时应进行阳性对照和阴性对照的验证。结果应进行记录和报告，以便后续的疾病防控工作。

相关标准：
GB/T 22470-2008 大熊猫饲养管理规范
GB/T 22471-2008 大熊猫疾病防治技术规范
DB51/T 1710.1-2013 大熊猫检疫技术—病原体检测技术规范—PCR方法
DB51/T 1710.2-2013 大熊猫检疫技术—病原体检测技术规范—ELISA方法
DB51/T 1710.3-2013 大熊猫检疫技术—病原体检测技术规范—微生物学方法