DB51/T 1710.2-2013
大熊猫检疫技术—犬瘟热病毒实验室检测技术规范—实时荧光RT-PCR方法
发布时间:2013-12-06 实施时间:2014-03-01


大熊猫是我国珍稀保护动物之一,其数量极为有限,因此对其进行疾病检测显得尤为重要。犬瘟热是一种病毒性疾病,对大熊猫的危害极大。因此,本标准制定了大熊猫犬瘟热病毒实验室检测的实时荧光RT-PCR方法,以确保大熊猫的健康。

1. 样品采集
样品采集应在动物临床症状出现后的早期阶段进行,采集的样品应为病毒感染的组织或分泌物。采集的样品应立即送至实验室进行处理。

2. 核酸提取
核酸提取应在无菌条件下进行,避免污染。提取的核酸应具有高纯度和高质量,以确保后续的PCR反应的准确性。

3. RT-PCR反应体系
RT-PCR反应体系应包括反转录酶、PCR引物、荧光探针等。反应体系的配制应根据实验室的具体情况进行优化,以确保反应的灵敏度和特异性。

4. PCR程序
PCR程序应根据反应体系的配制进行优化,以确保反应的灵敏度和特异性。PCR程序应包括反转录、预变性、PCR扩增等步骤。

5. 结果判定
结果判定应根据荧光信号的强度和阈值周期数进行。荧光信号强度高、阈值周期数低的样品为阳性,反之为阴性。同时,应设置阴性对照和阳性对照,以确保结果的准确性。

相关标准
GB/T 22470-2008 大熊猫标本采集、处理和保存规范
GB/T 22471-2008 大熊猫病原体检测技术规范
GB/T 22472-2008 大熊猫病理学检查规范
GB/T 22473-2008 大熊猫临床检查规范
GB/T 22474-2008 大熊猫麻醉和手术规范