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沙门氏菌是一种常见的细菌,可以引起人和动物的感染。其中,牦牛是沙门氏菌的重要宿主之一,其肉、奶及其制品都可能成为人类感染沙门氏菌的来源。因此,对牦牛源沙门氏菌的检测显得尤为重要。
PCR技术是一种高灵敏度、高特异性的检测方法,已经广泛应用于沙门氏菌的检测。本标准旨在规范牦牛源沙门氏菌PCR检测技术,以保证检测结果的准确性和可靠性。
1. 适用范围
本标准适用于牦牛源沙门氏菌PCR检测。
2. 规定
2.1 样品采集
样品采集应在无菌条件下进行,避免污染。采集样品应包括牦牛粪便、肠道内容物、肠壁组织等。样品应及时送达实验室进行处理。
2.2 DNA提取
DNA提取应采用商用DNA提取试剂盒,按照说明书进行操作。提取的DNA应经过纯化和浓缩处理,以保证PCR反应的灵敏度和特异性。
2.3 PCR反应体系
PCR反应体系应包括模板DNA、引物、酶、缓冲液和水。引物应选择与沙门氏菌特异性的引物,酶应选择高效的聚合酶。PCR反应体系的配制应按照实验室内部标准操作程序进行。
2.4 PCR程序
PCR程序应包括预变性、变性、退火、延伸和终止步骤。PCR程序的参数应根据引物的特性和实验室内部标准操作程序进行设置。
2.5 结果判定
PCR反应结束后,应进行凝胶电泳分析。分析结果应根据PCR产物的大小和特异性进行判定。阳性样品应呈现出特异性条带,阴性样品应无条带出现。
3. 报告
PCR检测结果应及时报告,并注明样品编号、检测方法、检测结果等信息。报告应符合实验室内部标准操作程序和相关法律法规的要求。
相关标准:
GB/T 4789.4-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 22470-2008 食品安全国家标准 牛、羊、猪、鸡、鸭、鹅肉和副产品中沙门氏菌检验方法
GB/T 22471-2008 食品安全国家标准 牛、羊、猪、鸡、鸭、鹅肉和副产品中沙门氏菌检验方法
GB/T 4789.5-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 肠道致病菌检验
GB/T 4789.10-2016 食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数和大肠菌群检验