一、范围
本标准适用于柑橘中橘红2号染料的测定。

二、仪器设备
1. 高效液相色谱仪：采用反相色谱柱，检测波长为470nm。
2. 称量仪：精度为0.1mg。
3. 超声波清洗仪：功率为100W。

三、试剂和材料
1. 橘红2号染料标准品：纯度不低于98%。
2. 甲醇：色谱纯。
3. 水：色谱纯。
4. 柑橘样品：经过清洗和去皮后，切成小块。

四、操作步骤
1. 标准曲线的制备
取橘红2号染料标准品0.1mg，加入10ml甲醇中，摇匀，称取适量的标准品溶液，分别加入10ml甲醇中，制备出不同浓度的标准曲线溶液。
2. 样品的制备
取柑橘样品10g，加入50ml甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液，过滤，取适量的样品溶液。
3. 色谱条件
色谱柱：C18反相色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）。
流动相：甲醇-水（70:30）。
流速：1.0ml/min。
检测波长：470nm。
进样量：20μl。
4. 操作步骤
（1）将标准曲线溶液和样品溶液分别进样，进行色谱分离。
（2）根据标准曲线计算样品中橘红2号染料的含量。

五、结果计算
样品中橘红2号染料的含量（mg/kg）=（样品峰面积/标准品峰面积）×标准品浓度×稀释倍数×1000/样品质量

六、质量控制
1. 标准曲线的线性范围：0.01~10μg/ml。
2. 标准曲线的相关系数：≥0.999。
3. 样品的加标回收率：80%~120%。
4. 样品的相对标准偏差：≤10%。

相关标准
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