副猪嗜血杆菌是一种常见的猪源性细菌性疾病病原体，能引起猪的败血症、肺炎、关节炎等疾病。为了及时发现和控制副猪嗜血杆菌的感染，需要对猪进行检测。本标准提供了一种间接免疫荧光检测方法，可用于副猪嗜血杆菌的检测。

试验原理：
本方法采用间接免疫荧光技术，利用荧光素标记的抗猪IgG抗体与待检血清中的副猪嗜血杆菌抗原结合，形成荧光素-抗原-抗体复合物，通过荧光显微镜观察荧光素的荧光信号，判断待检血清中是否存在副猪嗜血杆菌抗体。

试验步骤：
1. 样品处理：将待检血清离心去除悬浮物，取上清液进行检测。
2. 制备荧光素标记的抗猪IgG抗体：将荧光素标记的抗猪IgG抗体与PBS缓冲液混合，制备荧光素标记的抗猪IgG抗体工作液。
3. 制备副猪嗜血杆菌抗原：将副猪嗜血杆菌培养物离心，取上清液制备副猪嗜血杆菌抗原工作液。
4. 间接免疫荧光检测：将待检血清、荧光素标记的抗猪IgG抗体工作液、副猪嗜血杆菌抗原工作液混合，孵育后进行荧光显微镜观察。

结果判定：
1. 荧光素-抗原-抗体复合物呈现荧光信号，且荧光信号强度大于阴性对照，则判定为阳性。
2. 荧光素-抗原-抗体复合物未呈现荧光信号，或荧光信号强度小于阴性对照，则判定为阴性。

质量控制：
1. 采用已知阳性和阴性血清进行质量控制，确保试验结果准确可靠。
2. 每批试剂均需进行质量控制，确保试剂的稳定性和一致性。

相关标准
1. GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 副猪嗜血杆菌检验
2. GB/T 22388-2008 猪副嗜血杆菌病防治技术规程
3. GB/T 22387-2008 猪副嗜血杆菌病诊断技术规程
4. GB/T 22386-2008 猪副嗜血杆菌病病原学检测技术规程
5. GB/T 22385-2008 猪副嗜血杆菌病流行病学调查技术规程