DB51/T 2300-2016
基因A型和基因C型鸭甲肝病毒双重RT-PCR鉴别检测方法
发布时间:2016-12-20 实施时间:2017-01-01


鸭甲肝病毒是一种常见的鸭病毒,可引起鸭的急性肝炎和死亡。目前已知的鸭甲肝病毒分为基因A型和基因C型两种。基因A型鸭甲肝病毒主要分布在亚洲地区,而基因C型鸭甲肝病毒则主要分布在欧洲地区。由于两种病毒的病理学表现和临床症状相似,因此需要对其进行鉴别检测。

本标准提供了一种基因A型和基因C型鸭甲肝病毒双重RT-PCR鉴别检测方法。该方法利用RT-PCR技术,通过特异性引物扩增基因A型和基因C型鸭甲肝病毒的不同片段,从而实现两种病毒的鉴别检测。

具体操作步骤如下:

1. 样品处理:将待检样品(肝脏、肾脏、脾脏等组织)取出,加入PBS缓冲液中,制备10%的组织悬液。

2. RNA提取:使用RNA提取试剂盒提取样品中的总RNA。

3. RT-PCR反应:将提取的RNA作为模板,使用特异性引物进行RT-PCR反应。其中,基因A型鸭甲肝病毒的引物为F1/R1,基因C型鸭甲肝病毒的引物为F2/R2。

4. 电泳分析:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察PCR产物的大小和带型,从而判断样品中是否存在基因A型和基因C型鸭甲肝病毒。

本标准的实施可以提高鸭甲肝病毒的鉴别检测准确性和可靠性,为鸭甲肝病毒的防控提供技术支持。

相关标准:
1. GB/T 4789.33-2016 食品安全国家标准 鸭甲肝病毒检验方法
2. GB/T 22470-2008 鸭甲肝病毒灭活疫苗
3. DB51/T 2299-2016 鸭甲肝病毒基因A型和基因C型RT-PCR检测方法
4. DB51/T 2301-2016 鸭甲肝病毒基因A型和基因C型PCR检测方法
5. DB51/T 2302-2016 鸭甲肝病毒基因A型和基因C型实时荧光定量PCR检测方法