野生大熊猫是我国珍稀的国宝动物,其数量极为有限,因此对其保护和研究显得尤为重要。野生大熊猫的粪便样品是研究其生态、遗传、营养等方面的重要材料,而采集和提取粪便样品的技术要求较高,需要遵循一定的规范和标准。本标准就是为了规范野生大熊猫粪便样品的采集和DNA提取技术,以保证研究结果的准确性和可靠性。
1. 适用范围
本标准适用于野生大熊猫粪便样品的采集和DNA提取,包括野生大熊猫的粪便样品采集、保存、运输和DNA提取等方面的技术要求和方法。
2. 术语和定义
2.1 野生大熊猫粪便样品:指野生大熊猫在自然环境中排泄的粪便样品。
2.2 DNA提取:指从野生大熊猫粪便样品中提取DNA的过程。
2.3 PCR扩增:指通过聚合酶链式反应(PCR)技术扩增野生大熊猫粪便样品中的DNA。
3. 野生大熊猫粪便样品采集
3.1 采集时间:采集时间应选择在早晨或傍晚,因为这时野生大熊猫的代谢活动较为活跃,粪便样品的质量较好。
3.2 采集地点:采集地点应选择在野生大熊猫活动频繁的地区,如竹林、草地等。
3.3 采集方法:采集时应使用无菌手套和无菌采集器具,避免污染样品。采集时应选择新鲜的粪便样品,避免受到阳光暴晒和雨水冲刷等影响。
4. 野生大熊猫粪便样品保存和运输
4.1 保存:采集到的粪便样品应立即放入无菌离心管中,并在-20℃以下保存,避免样品的降解和污染。
4.2 运输:采集到的粪便样品应在冰袋中运输,避免样品的温度升高和污染。
5. DNA提取
5.1 样品处理:将采集到的粪便样品在无菌条件下进行处理,去除其中的杂质和污染物。
5.2 DNA提取:采用商用DNA提取试剂盒进行DNA提取,按照试剂盒说明书进行操作。
5.3 DNA纯化:采用商用DNA纯化试剂盒进行DNA纯化,按照试剂盒说明书进行操作。
6. PCR扩增
6.1 PCR反应体系:根据实验需要选择合适的PCR反应体系,包括引物、模板DNA、酶和缓冲液等。
6.2 PCR反应条件:根据实验需要选择合适的PCR反应条件,包括温度、时间和循环次数等。
6.3 PCR产物检测:采用凝胶电泳或其他方法对PCR产物进行检测和分析。
相关标准
GB/T 19423-2004 野生动物生态学调查技术规范
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