：
猪繁殖与呼吸障碍综合症（PRRS）是一种由猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒（PRRSV）引起的疾病，其症状包括高烧、呼吸困难、流涕、咳嗽等。PRRSV是一种单股正链RNA病毒，其基因组长度为15kb，包含至少9个开放阅读框（ORF）。RT-PCR技术是一种敏感、特异、快速的检测PRRSV的方法，已被广泛应用于PRRSV的检测和研究。

1. 样品采集
样品采集应在PRRS病毒高发期进行，采集的样品包括猪血清、肺组织、鼻咽分泌物等。采集时应注意避免污染和交叉感染。

2. RNA提取
RNA提取是RT-PCR检测的关键步骤，应选择高质量的RNA提取试剂盒进行提取。提取过程中应注意避免RNA降解和污染。

3. RT-PCR反应体系的制备
RT-PCR反应体系包括反转录反应和PCR扩增反应。反转录反应需要引物、酶、dNTPs等，PCR扩增反应需要引物、酶、dNTPs、MgCl2等。反应体系的制备应按照试剂盒说明书进行，注意反应体系的配比和混匀。

4. PCR扩增程序
PCR扩增程序应根据试剂盒说明书进行设置，包括初始变性、循环扩增和终止延伸等步骤。PCR扩增程序的设置应根据引物的特异性和扩增产物的大小进行优化。

5. PCR产物检测和结果判定
PCR产物检测可以采用琼脂糖凝胶电泳、荧光定量PCR、实时荧光定量PCR等方法。结果判定应根据PCR产物的大小和特异性进行判断，同时应设置阳性对照和阴性对照。

相关标准：
1. GB/T 21415-2008 猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒检测方法
2. GB/T 21416-2008 猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒抗体检测方法
3. GB/T 21417-2008 猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒灭活疫苗
4. GB/T 21418-2008 猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒活疫苗
5. GB/T 21419-2008 猪繁殖与呼吸障碍综合症病毒分离鉴定方法