DB45/T 236-2005
聚合酶链反应检测对虾白斑综合征病毒的技术操作规程
发布时间:2005-10-10 实施时间:2005-10-30


对虾白斑综合征病毒是一种对虾病毒性疾病,对虾养殖业是一种重要的经济产业。为了及时、准确地检测对虾白斑综合征病毒,保障对虾养殖业的健康发展,本标准制定了聚合酶链反应检测对虾白斑综合征病毒的技术操作规程。

1.样品采集
样品采集应在对虾发病高峰期进行,采集对虾体内组织或体液样品,如肌肉、肝脏、血淋巴液等。采集时应注意避免污染,采集后应立即送至实验室进行处理。

2.样品提取
样品提取应采用商用提取试剂盒,按照说明书进行操作。提取后的DNA样品应立即进行PCR反应,或在-20℃保存。

3.PCR反应体系
PCR反应体系应包括PCR反应缓冲液、dNTPs、引物、Taq酶、模板DNA等。具体配方应根据实验室条件和试剂盒说明进行调整。

4.PCR反应程序
PCR反应程序应根据试剂盒说明进行设置,一般包括预变性、变性、退火、延伸等步骤。反应温度和时间应根据试剂盒说明进行设置。

5.PCR产物检测
PCR产物检测应采用凝胶电泳或其他方法进行检测。凝胶电泳应使用1.5%琼脂糖凝胶,电泳条件应根据试剂盒说明进行设置。检测结果应根据PCR产物的大小和数量进行判断。

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