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反转录聚合酶链反应（RT-PCR）是一种敏感、特异、快速的核酸检测技术，广泛应用于病毒、细菌等微生物的检测。禽脑脊髓炎病毒（AEV）是一种常见的禽类病毒，对禽类养殖业造成了严重的经济损失。本标准旨在规范禽脑脊髓炎病毒的RT-PCR检测技术操作，提高检测准确性和可靠性。

1. 范围
本标准适用于禽脑脊髓炎病毒的RT-PCR检测。

2. 规定
2.1 样品采集
样品采集应在病鸟发病后24小时内进行，采集脑组织、脊髓组织或者血液样品。采集后应立即送至实验室进行处理。

2.2 RNA提取
RNA提取应采用RNA提取试剂盒，按照试剂盒说明书进行操作。提取后的RNA应立即进行RT-PCR反应。

2.3 RT-PCR反应体系的制备
RT-PCR反应体系应包括反转录酶、PCR扩增酶、引物、模板RNA和其他试剂。反应体系的制备应按照试剂盒说明书进行操作。

2.4 PCR扩增程序
PCR扩增程序应包括预变性、反转录、PCR扩增和终止步骤。PCR扩增程序的参数应按照试剂盒说明书进行设置。

2.5 PCR产物检测和结果判定
PCR产物检测应采用凝胶电泳或者实时荧光定量PCR技术进行。结果判定应根据PCR产物的大小和荧光信号强度进行判断。

3. 报告
检测结果应详细记录，包括样品编号、检测方法、结果判定等信息。检测结果应及时报告给相关部门和单位。

相关标准：
GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 检验和检疫标准
GB/T 21415-2008 禽流感病毒检测方法
GB/T 22470-2008 禽流感病毒灭活疫苗
GB/T 22471-2008 禽流感病毒灭活疫苗注射液
GB/T 22472-2008 禽流感病毒灭活疫苗冻干粉