DB45/T 531-2008
鸡传染性喉气管炎PCR快速检测技术规程
发布时间:2008-08-08 实施时间:2008-09-08


鸡传染性喉气管炎是由禽传染性支原体引起的一种急性呼吸道传染病,严重影响了家禽养殖业的发展。PCR技术是一种高灵敏度、高特异性的检测方法,已经成为鸡传染性喉气管炎的主要检测手段之一。本标准旨在规范鸡传染性喉气管炎PCR快速检测技术,提高检测准确性和可靠性。

1. 要求
1.1 试剂和仪器设备应符合国家相关标准或行业标准的要求。
1.2 检测人员应具备相关专业知识和技能,严格遵守操作规程。
1.3 检测环境应符合PCR实验室的要求,避免污染和交叉感染。
1.4 检测过程中应进行质量控制,确保检测结果的准确性和可靠性。

2. 方法
2.1 样品采集:采集鸡喉咙分泌物或组织样品,避免污染和损伤。
2.2 DNA提取:采用商用DNA提取试剂盒或自制试剂盒提取样品DNA。
2.3 PCR扩增:采用特异性引物扩增鸡传染性喉气管炎相关基因片段。
2.4 电泳分析:将PCR产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察扩增产物的大小和形态。

3. 试剂
3.1 DNA提取试剂盒:商用DNA提取试剂盒或自制试剂盒。
3.2 PCR试剂盒:包括特异性引物、酶、缓冲液等。
3.3 琼脂糖:用于PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析。

4. 仪器设备
4.1 PCR仪:用于PCR扩增反应。
4.2 凝胶电泳装置:用于PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析。
4.3 紫外光转移仪:用于PCR产物的琼脂糖凝胶电泳分析结果的观察和记录。

5. 质量控制
5.1 采用阳性对照和阴性对照进行质量控制,确保检测结果的准确性和可靠性。
5.2 对阳性样品进行序列分析,验证PCR扩增产物的特异性和准确性。

6. 结果判定和报告
6.1 根据PCR扩增产物的大小和形态,判断样品是否为鸡传染性喉气管炎阳性。
6.2 结果应详细记录,包括样品编号、检测日期、检测人员、检测方法、结果判定等信息。
6.3 结果应及时报告,确保检测结果的有效性和可靠性。

相关标准
GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 5009.33-2016 食品中亚硝酸盐的测定
GB/T 6682-2008 分析化学实验室通用规定
GB/T 191-2008 包装通用术语
GB/T 6688-2008 分析化学实验室水质实验室规范