钩藤是一种常见的中药材，具有清热解毒、祛风止痛等功效。其中的主要有效成分是钩藤碱，因此钩藤中钩藤碱含量的测定对于药材的质量控制具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱法测定钩藤中钩藤碱含量。具体操作步骤如下：

1. 仪器和试剂
（1）高效液相色谱仪：采用反相色谱柱，检测波长为220nm。
（2）色谱柱：C18色谱柱，4.6mm×250mm，5μm。
（3）移液器：1ml、5ml、10ml。
（4）量筒：10ml、50ml。
（5）瓶塞：用于密封瓶口。
（6）甲醇：色谱纯。
（7）乙腈：色谱纯。
（8）磷酸二氢钾：分析纯。
（9）超纯水：用于制备溶液。

2. 样品的制备
取钩藤药材，粉碎成粉末，过筛后取适量样品，加入磨瓶中，加入甲醇，超声提取30分钟，离心沉淀，取上清液，用超纯水稀释至适宜浓度。

3. 色谱条件
（1）流动相：甲醇-乙腈-0.05%磷酸二氢钾溶液（30:70:0.1）。
（2）流速：1.0ml/min。
（3）柱温：30℃。
（4）检测波长：220nm。
（5）进样量：10μl。

4. 标准曲线的绘制
取一定浓度的钩藤碱标准品，按照上述方法进行测定，绘制标准曲线。

5. 样品的测定
取适量的样品，按照上述方法进行测定，计算出钩藤碱的含量。

相关标准
GB/T 5492-2008 中药材质量控制标准
GB/T 20394-2006 中药材质量控制标准
DB45/T 719-2010 钩藤中总生物碱含量的测定 高效液相色谱法
DB45/T 720-2010 钩藤中钩藤酸含量的测定 高效液相色谱法
DB45/T 721-2010 钩藤中钩藤内酯含量的测定 高效液相色谱法