一、范围
本标准适用于鸡血藤中芒柄花素含量的测定。
二、仪器设备
1. 高效液相色谱仪:采用反相色谱柱,检测波长为360nm。
2. 称量仪:精度为0.1mg。
3. 超声波清洗仪:功率为100W。
三、试剂和材料
1. 芒柄花素标准品:纯度≥98%。
2. 甲醇:色谱纯。
3. 硝酸:分析纯。
4. 氯仿:色谱纯。
5. 鸡血藤样品:干燥后研磨成粉末。
四、操作步骤
1. 标准曲线的制备
取芒柄花素标准品0.1mg,加入10ml甲醇中,摇匀,称取适量的标准品溶液,分别加入10ml甲醇中,制备出不同浓度的标准曲线溶液。
2. 样品的制备
取鸡血藤样品0.5g,加入50ml甲醇中,超声波清洗10分钟,离心,取上清液,再加入50ml甲醇中,超声波清洗10分钟,离心,取上清液,将上清液过滤,取滤液备用。
3. 色谱条件
色谱柱:C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm)。
流动相:甲醇-水(70:30)。
流速:1.0ml/min。
检测波长:360nm。
进样量:10μl。
4. 色谱分析
将标准曲线溶液和样品滤液分别进样,进行色谱分析,记录峰面积,计算出芒柄花素的含量。
五、计算方法
芒柄花素的含量(mg/g)=(样品峰面积/标准曲线斜率)×(标准品质量/样品质量)
六、结果表示
结果保留两位小数,单位为mg/g。
七、质量控制
1. 标准曲线的线性范围为0.01~1.0μg/ml,相关系数R2≥0.999。
2. 重复性:同一样品测定3次,相对标准偏差(RSD)不大于2.0%。
3. 平行测定:同一样品在同一天内进行平行测定3次,相对标准偏差(RSD)不大于2.0%。
4. 加标回收率:在样品中加入不同浓度的标准品,进行回收实验,回收率在95%~105%之间。
相关标准
1. DB45/T 781-2011 鸡血藤中总黄酮含量的测定 高效液相色谱法
2. DB45/T 782-2011 鸡血藤中总生物碱含量的测定 高效液相色谱法
3. DB45/T 783-2011 鸡血藤中总多糖含量的测定 高效液相色谱法
4. DB45/T 784-2011 鸡血藤中总皂苷含量的测定 高效液相色谱法
5. DB45/T 785-2011 鸡血藤中总黄酮苷含量的测定 高效液相色谱法