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牛隐孢子虫是一种寄生在牛的小肠上皮细胞中的原生动物，是引起牛隐孢子虫病的病原体。牛隐孢子虫病是一种常见的牛病，严重影响了牛的生产和健康。因此，对牛隐孢子虫的检测非常重要。

多重聚合酶链反应法是一种高灵敏度、高特异性的检测方法，已经广泛应用于各种病原体的检测。本标准采用多重聚合酶链反应法进行牛隐孢子虫的检测。

本标准的具体操作步骤如下：

1. 样品的采集和处理

从牛的小肠中取样，将样品放入离心管中，加入PBS缓冲液，离心沉淀，去除上清液，加入蛋白酶K，室温下孵育30分钟，加入SDS，65℃下孵育30分钟，离心沉淀，去除上清液，加入异丙醇，室温下沉淀30分钟，离心沉淀，去除上清液，加入70%乙醇，室温下洗涤2次，去除上清液，将沉淀干燥。

2. DNA的提取

将样品沉淀加入TE缓冲液，室温下孵育30分钟，离心沉淀，去除上清液，加入蛋白酶K，室温下孵育30分钟，加入异丙醇，室温下沉淀30分钟，离心沉淀，去除上清液，加入70%乙醇，室温下洗涤2次，去除上清液，将沉淀干燥，加入TE缓冲液，65℃下孵育30分钟，离心沉淀，取上清液，即为DNA提取物。

3. PCR反应

将DNA提取物加入PCR反应管中，加入PCR反应液，进行PCR反应。PCR反应条件为：95℃预变性5分钟，95℃变性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸30秒，共35个循环，最后72℃延伸10分钟。

4. PCR产物的检测

将PCR产物进行凝胶电泳，观察PCR产物的条带，判断是否存在牛隐孢子虫。

相关标准：
GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 4789.4-2016 食品微生物学检验 肠道致病菌检验
GB/T 4789.5-2016 食品微生物学检验 耐热性芽孢杆菌检验
GB/T 4789.10-2016 食品微生物学检验 大肠杆菌检验
GB/T 4789.11-2016 食品微生物学检验 菌落计数法