猪传染性胃肠炎病毒（Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）是一种高度传染性的病毒，能引起猪的急性胃肠炎，严重影响猪的生长发育和养殖业的经济效益。为了及时、准确地检测PEDV，保障猪的健康和养殖业的可持续发展，制定了本标准。

技术要求：
1. RT-PCR反应体系应包括PEDV特异性引物和探针，反应体系的最终体积为25μL。
2. RT-PCR反应条件应符合PEDV特异性引物和探针的要求，反应温度和时间应根据试剂盒的要求进行设置。
3. RT-PCR反应后，应进行凝胶电泳检测，检测结果应与PEDV阳性对照和阴性对照进行比较。

试剂盒要求：
1. 试剂盒应包括PEDV特异性引物和探针，反应体系的最终体积为25μL。
2. 试剂盒应具有良好的特异性和灵敏度，能够检测到PEDV的所有亚型。
3. 试剂盒应具有良好的稳定性和重复性，能够在不同实验室和不同操作者之间得到一致的结果。

操作程序：
1. 样品的采集、保存和运输应符合相关标准的要求。
2. 样品的提取和纯化应根据试剂盒的要求进行操作。
3. RT-PCR反应应在无菌条件下进行，反应体系的配制和反应条件应根据试剂盒的要求进行操作。
4. RT-PCR反应后，应进行凝胶电泳检测，检测结果应与PEDV阳性对照和阴性对照进行比较。

结果判定：
1. 根据PEDV特异性引物和探针的扩增情况，判断样品是否为PEDV阳性。
2. 根据PEDV阳性对照和阴性对照的扩增情况，判断RT-PCR反应的准确性和可靠性。

质量控制：
1. 每批次试剂盒应进行质量控制，包括PEDV阳性对照和阴性对照的检测。
2. 每批次样品应进行质量控制，包括PEDV阳性样品和阴性样品的检测。
3. 每个实验室应建立质量控制体系，保证检测结果的准确性和可靠性。

相关标准
GB/T 22470-2008 猪传染性胃肠炎病毒检测方法
GB/T 22471-2008 猪传染性胃肠炎病毒灭活疫苗
GB/T 22472-2008 猪传染性胃肠炎病毒活疫苗
GB/T 22473-2008 猪传染性胃肠炎病毒抗体检测方法
GB/T 22474-2008 猪传染性胃肠炎病毒抗原检测方法