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犬狂犬病是一种由狂犬病病毒引起的急性传染病，对人和动物都有很大的危害。犬狂犬病抗体检测是犬只接种狂犬病疫苗后的重要指标，也是犬只进入某些国家或地区的必要条件之一。本标准旨在规范犬狂犬病抗体检测酶联免疫吸附法的方法和要求，以确保检测结果的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于犬狂犬病抗体检测酶联免疫吸附法的方法和要求。

2.术语和定义
2.1 犬狂犬病抗体：犬体内产生的针对狂犬病病毒的免疫球蛋白。
2.2 酶联免疫吸附法：一种利用酶标记抗体或抗原与待检测物质结合的方法，通过酶反应产生颜色变化来检测待检测物质的方法。

3.原理
本方法采用酶联免疫吸附法，利用狂犬病病毒抗原与待检测血清中的犬狂犬病抗体结合，再加入酶标记的抗犬IgG抗体，形成复合物，经过洗涤后加入底物，通过酶反应产生颜色变化，根据颜色的深浅来判断待检测血清中的犬狂犬病抗体水平。

4.试剂和仪器
4.1 试剂：包括狂犬病病毒抗原、酶标记的抗犬IgG抗体、底物等。
4.2 仪器：包括酶标仪、洗板机等。

5.样品采集和处理
5.1 采集样品：采用静脉血采集方式采集待检测犬只的血清样品。
5.2 样品处理：将采集的血清样品离心，去除悬浮的细胞和颗粒物，得到清晰的血清样品。

6.操作步骤
6.1 样品稀释：将待检测血清样品按照一定比例稀释。
6.2 加样：将稀释后的血清样品加入已经涂有狂犬病病毒抗原的微孔板中，孵育一定时间。
6.3 洗涤：将孵育后的微孔板进行洗涤，去除未结合的血清成分。
6.4 加标记抗体：加入酶标记的抗犬IgG抗体，孵育一定时间。
6.5 再次洗涤：将孵育后的微孔板进行洗涤，去除未结合的抗体。
6.6 加底物：加入底物，孵育一定时间。
6.7 终止反应：加入终止液，停止底物反应。
6.8 测定吸光度：使用酶标仪测定吸光度值。
6.9 计算结果：根据吸光度值计算出待检测血清中的犬狂犬病抗体水平。

7.结果判定
7.1 结果判定标准：根据不同的检测要求和标准，确定犬狂犬病抗体水平的阈值。
7.2 结果判定方法：根据待检测血清的吸光度值和阈值进行比较，判断待检测血清中的犬狂犬病抗体水平是否符合要求。

8.质量控制
8.1 内部质量控制：每次检测都应该设置内部质量控制，确保检测结果的准确性和可靠性。
8.2 外部质量控制：定期参加外部质量控制，评估实验室的检测水平和质量。

相关标准：
GB/T 22470-2008 犬狂犬病疫苗
GB/T 22471-2008 犬狂犬病疫苗免疫程序
GB/T 22472-2008 犬狂犬病疫苗免疫效果评价
GB/T 22473-2008 犬狂犬病疫苗免疫程序监测
GB/T 22474-2008 犬狂犬病疫苗免疫程序监测结果评价