猪流行性腹泻病毒（PEDV）是一种高度传染性的病毒，能够引起猪的急性胃肠炎。PEDV的传播速度快，病死率高，对猪业造成了严重的经济损失。因此，对PEDV的检测非常重要。

本标准采用RT-PCR法对PEDV进行检测。RT-PCR法是一种高灵敏度、高特异性的检测方法，能够快速、准确地检测出PEDV。

检测前的准备工作：
1. 样品的采集和处理：采集猪粪便、肠道组织、粪便和肠道组织混合物等样品，将样品加入PBS缓冲液中，制备10%的悬浮液。
2. RNA的提取：使用RNA提取试剂盒提取样品中的RNA。
3. RT-PCR反应体系的制备：根据试剂盒说明书制备RT-PCR反应体系。

RT-PCR反应体系的制备：
1. 10×RT-PCR反应缓冲液 5μL
2. MgCl2（25mM） 2μL
3. dNTP混合物（10mM） 1μL
4. RT酶 1μL
5. RNase抑制剂 0.5μL
6. PEDV特异性引物（10μM） 1μL
7. RNA模板 5μL
8. 离子水 34.5μL

RT-PCR反应条件：
1. 反应温度：50℃，30min
2. 热变性：95℃，5min
3. PCR循环：95℃，30s；55℃，30s；72℃，30s，共40个循环
4. 最终延伸：72℃，10min

RT-PCR反应结束后，将PCR产物进行凝胶电泳，观察PCR产物的大小和数量，判断PEDV是否存在。

相关标准
1. GB/T 4789.3-2016 食品微生物学检验 基本规定
2. GB/T 6682-2008 分析化学实验室水质规范
3. GB/T 191-2008 包装、储运和保管图形符号
4. GB/T 5009.3-2016 食品中病原菌的检验 Salmonella spp.
5. GB/T 5009.4-2016 食品中病原菌的检验 Staphylococcus aureus