石崖茶是一种生长在中国云南省石崖山区的茶叶,因其生长环境独特,茶叶中含有丰富的山茶苷A,具有很高的药用价值。为了保证石崖茶的质量,需要对其中的山茶苷A进行测定。本标准就是为了规定石崖茶中山茶苷A的测定方法。
1.范围
本标准适用于石崖茶中山茶苷A的测定,采用高效液相色谱法进行测定。
2.仪器和试剂
2.1 仪器
高效液相色谱仪、电子天平、超声波清洗器、移液器、pH计等。
2.2 试剂
甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、三氯乙酸、山茶苷A标准品等。
3.样品的制备
3.1 取石崖茶样品10g,粉碎成细粉末。
3.2 取粉末1g,加入50ml甲醇,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
3.3 取上清液2ml,加入50ml乙腈,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.标准曲线的绘制
4.1 取山茶苷A标准品0.1mg,加入10ml甲醇,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.2 取上清液1ml,加入10ml乙腈,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.3 取上清液1ml,加入10ml水,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.4 取上清液1ml,加入10ml磷酸二氢钾缓冲液(pH=2.5),超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.5 以上清液中山茶苷A的浓度为0.01mg/ml,分别取0.1ml、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml,加入10ml乙腈中,超声波清洗10min,离心10min,取上清液。
4.6 取上清液20μl,注入高效液相色谱仪中,进行检测。
5.样品的测定
5.1 取步骤3.3中的上清液20μl,注入高效液相色谱仪中,进行检测。
5.2 根据标准曲线计算出样品中山茶苷A的含量。
6.结果的计算
样品中山茶苷A的含量,按下式计算:
样品中山茶苷A的含量(mg/g)=[(样品中山茶苷A的峰面积/标准曲线斜率)×10]/样品质量(g)
相关标准
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