宽体金线蛭是一种常见的水生动物，其体内含有丰富的营养物质，其中游离核苷酸是一种重要的营养成分。游离核苷酸是由核苷酸水解而来的单核苷酸，具有增强免疫力、促进生长发育等作用。因此，测定宽体金线蛭中游离核苷酸含量对于评价其营养价值具有重要意义。

本标准采用高效液相色谱法进行测定，具体步骤如下：

1. 样品制备：取适量宽体金线蛭样品，加入适量的磷酸盐缓冲液，经过超声处理和离心，得到样品提取液。

2. 样品处理：将样品提取液经过固相萃取柱处理，得到游离核苷酸的纯化液。

3. 色谱条件：采用反相高效液相色谱法进行分析，流动相为甲醇-水（含0.1%三乙胺），梯度洗脱，检测波长为260nm。

4. 标准曲线：采用外标法建立游离核苷酸的标准曲线，测定样品中游离核苷酸的含量。

5. 结果计算：根据标准曲线计算样品中游离核苷酸的含量。

相关标准
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