DB45/T 2026-2019
甘蔗DNA指纹图谱采集技术规程
发布时间:2019-12-05 实施时间:2019-12-30


甘蔗是一种重要的经济作物,其品种鉴定、遗传多样性分析、种质资源保护和利用等需要依赖于DNA指纹图谱。本标准旨在规范甘蔗DNA指纹图谱采集技术,确保其准确性和可靠性。

1.适用范围
本标准适用于甘蔗DNA指纹图谱采集技术的要求、方法和步骤。

2.术语和定义
2.1 DNA指纹图谱
DNA指纹图谱是通过PCR扩增DNA片段,然后通过电泳分离,最后形成的DNA条带图谱。

2.2 PCR扩增
PCR扩增是指通过聚合酶链式反应(PCR)技术,将DNA片段扩增至足够数量的过程。

2.3 电泳分离
电泳分离是指将PCR扩增产生的DNA片段通过电泳技术分离的过程。

3.采集样品
3.1 样品选择
选择健康、生长良好、无病虫害的甘蔗植株作为采集样品。

3.2 样品处理
将甘蔗叶片或嫩茎切成小块,放入离心管中,加入液氮冷冻保存。

4. DNA提取
4.1 提取试剂
选择适合甘蔗DNA提取的试剂,如CTAB法、酚/氯仿法等。

4.2 提取步骤
按照试剂说明书进行DNA提取,注意避免DNA污染和降解。

5. PCR扩增
5.1 PCR反应体系
根据PCR试剂盒说明书配置PCR反应体系,包括模板DNA、引物、酶、缓冲液等。

5.2 PCR反应条件
根据PCR试剂盒说明书设置PCR反应条件,包括温度、时间等。

6. 电泳分离
6.1 准备电泳仪
根据电泳仪说明书准备电泳仪,包括加热、冷却、电极等。

6.2 电泳条件
根据PCR反应产物大小和电泳仪说明书设置电泳条件,包括电压、时间等。

7. 图谱分析
7.1 图谱读取
将电泳板放入图谱读取仪中,读取DNA条带图谱。

7.2 图谱分析
根据DNA条带图谱进行分析,包括条带数量、大小、位置等。

相关标准:
GB/T 20481-2006 甘蔗品种分类和命名方法
GB/T 20482-2006 甘蔗种质资源分类和命名方法
GB/T 20483-2006 甘蔗品种鉴定方法
GB/T 20484-2006 甘蔗遗传多样性分析方法
GB/T 20485-2006 甘蔗种质资源保护和利用