DB45/T 2031-2019
甘蔗白叶病植原体巢式PCR检测技术规程
发布时间:2019-12-05 实施时间:2019-12-30


甘蔗白叶病是由甘蔗白叶病毒引起的一种重要的病害,严重影响甘蔗的产量和质量。为了及时、准确地检测甘蔗白叶病植原体,保障甘蔗生产的健康发展,制定了本标准。

一、要求
1.1 试剂和仪器设备应符合国家相关标准或行业标准的要求。
1.2 检测人员应具备相关的专业知识和技能,严格遵守操作规程,保证检测结果的准确性和可靠性。
1.3 检测过程中应采取有效的质量控制措施,确保检测结果的可比性和稳定性。

二、方法
2.1 样品处理
将甘蔗叶片样品取出,去除表面的污物和杂质,用无菌水洗涤后晾干,然后切成小块备用。
2.2 DNA提取
将样品加入提取液中,经过一系列的离心、洗涤、干燥等步骤,最终得到DNA提取物。
2.3 PCR扩增
将DNA提取物加入PCR反应体系中,进行巢式PCR扩增,最终得到PCR产物。
2.4 结果分析
将PCR产物进行电泳分析,根据PCR产物的大小和带型,判断样品中是否存在甘蔗白叶病植原体。

三、步骤
3.1 样品处理
将甘蔗叶片样品取出,去除表面的污物和杂质,用无菌水洗涤后晾干,然后切成小块备用。
3.2 DNA提取
将样品加入提取液中,经过一系列的离心、洗涤、干燥等步骤,最终得到DNA提取物。
3.3 PCR扩增
将DNA提取物加入PCR反应体系中,进行巢式PCR扩增,最终得到PCR产物。
3.4 结果分析
将PCR产物进行电泳分析,根据PCR产物的大小和带型,判断样品中是否存在甘蔗白叶病植原体。

四、试剂
4.1 DNA提取试剂盒
4.2 PCR试剂盒
4.3 DNA Marker
4.4 Agarose

五、仪器设备
5.1 离心机
5.2 PCR仪
5.3 电泳仪

六、质量控制
6.1 采用阳性对照和阴性对照,确保检测结果的准确性和可靠性。
6.2 严格控制反应体系的温度、时间、试剂用量等参数,保证检测结果的稳定性和可比性。

七、结果判定和报告
7.1 根据PCR产物的大小和带型,判断样品中是否存在甘蔗白叶病植原体。
7.2 检测结果应详细记录,并及时向有关部门报告。

相关标准:
GB/T 191-2008 包装通用术语
GB/T 2828.1-2012 采样检验程序 第1部分:按计划采样的抽样程序
GB/T 2829-2002 采样检验程序与表观检验程序的制定
GB/T 5009.3-2016 食品中灰分的测定
GB/T 5009.4-2017 食品中粗蛋白的测定