DB45/T 2171-2020
甘蔗品种真实性鉴定 SSR分子标记法
发布时间:2020-10-29 实施时间:2020-11-30
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甘蔗是一种重要的经济作物,其品种的真实性鉴定对于保护品种权益、推广优良品种、提高甘蔗生产效益具有重要意义。SSR分子标记法是一种常用的分子生物学技术,可以通过PCR扩增和电泳分析甘蔗DNA中的SSR位点,从而实现甘蔗品种真实性鉴定。
1. 适用范围
本标准适用于甘蔗品种真实性鉴定的SSR分子标记法。
2. 样品的采集
样品采集应选择生长健壮、无病虫害的甘蔗植株,采集新鲜叶片或嫩茎,避免受到污染和损伤。样品应立即放入液氮中保存,或者在-80℃的冰箱中保存。
3. DNA的提取
样品的DNA提取应根据实验室的标准操作程序进行,常用的方法包括CTAB法、酚/氯仿法等。提取的DNA应经过质量检测,确保DNA的完整性和纯度。
4. PCR扩增
PCR扩增应根据实验室的标准操作程序进行,常用的方法包括单倍型PCR、多重PCR等。PCR反应体系应根据实验需要进行优化,反应条件应根据不同的引物和模板DNA进行调整。PCR扩增后的产物应经过质量检测,确保PCR产物的特异性和纯度。
5. 电泳分析
PCR产物的电泳分析应根据实验室的标准操作程序进行,常用的方法包括聚丙烯酰胺凝胶电泳、毛细管电泳等。电泳条件应根据实验需要进行优化,电泳结果应经过质量检测,确保电泳图谱的清晰和可靠性。
相关标准:
GB/T 20481-2006 甘蔗品种分类和命名方法
GB/T 20482-2006 甘蔗品种资源调查规范
GB/T 20483-2006 甘蔗品种资源保存规范
GB/T 20484-2006 甘蔗品种资源鉴定规范
GB/T 20485-2006 甘蔗品种资源利用规范