DB45/T 2312-2021
水牛体细胞核移植技术操作规程
发布时间:2021-04-25 实施时间:2021-05-31


水牛体细胞核移植技术是一种重要的生物技术手段,可以用于繁殖优良品种的水牛。为了保证水牛体细胞核移植技术的操作规范和实验结果的准确性,本标准制定了以下操作规程:

1. 实验前准备
1.1 实验室环境
水牛体细胞核移植实验室应具备良好的通风条件和恒温恒湿的环境,温度应控制在20-25℃,相对湿度应控制在50%-70%之间。
1.2 实验器材
水牛体细胞核移植实验所需的器材包括显微镜、离心机、培养箱、移液器、注射器、超声波仪等,应保证器材的清洁和完好无损。
1.3 实验试剂
水牛体细胞核移植实验所需的试剂包括培养基、胚胎移植液、荧光素等,应保证试剂的质量和纯度。

2. 体细胞核移植
2.1 细胞培养
将水牛体细胞分离培养,培养基的配方应根据实验需要进行调整,培养时间应控制在3-5天之间。
2.2 核移植
将培养好的体细胞取出,用显微镜观察细胞形态,选择形态正常、健康的细胞进行核移植。将体细胞核移植到去核卵母细胞内,移植后应立即进行电融合或化学融合。
2.3 胚胎培养
将融合后的胚胎培养在含有适当营养物质的培养基中,培养时间应根据实验需要进行调整。

3. 胚胎移植
将培养好的胚胎移植到受体母牛子宫内,移植前应进行超声波检测,确保胚胎的健康和发育情况。移植后应密切观察受体母牛的情况,及时处理异常情况。

4. 妊娠检测
在移植后30天左右,应进行妊娠检测,检测方法包括超声波检测、血液学检测等,确保移植胚胎的妊娠率和胚胎发育情况。

相关标准
GB/T 19649-2018 水牛品种分类和命名
GB/T 19650-2018 水牛遗传资源保护与利用
GB/T 19651-2018 水牛繁殖技术规范
GB/T 19652-2018 水牛饲养管理规范
GB/T 19653-2018 水牛产品质量安全规范