DB44/T 664-2009
鹅的禽副粘病毒病与高致病性禽流感(H5亚型)的H1和多重RT-PCR鉴别诊断技术操作规程
发布时间:2009-08-06 实施时间:2009-12-01


鹅的禽副粘病毒病与高致病性禽流感(H5亚型)是鹅的一种重要传染病,对鹅的养殖业造成了严重的经济损失。为了及时、准确地诊断和控制这些疾病,需要建立一套可靠的鉴别诊断技术。本标准就是为了规范鹅的禽副粘病毒病与高致病性禽流感(H5亚型)的H1和多重RT-PCR鉴别诊断技术的操作规程。

1. 适用范围

本标准适用于鹅的禽副粘病毒病与高致病性禽流感(H5亚型)的H1和多重RT-PCR鉴别诊断。

2. 样品采集

2.1 采集样品应选择病死鹅或病鹅的肺、肝、脾、肾等组织,或者病鹅的血液、粪便、咽拭子等样品。

2.2 采集样品时应注意避免污染,采集后应立即送至实验室进行处理。

3. 核酸提取

3.1 样品处理前应先进行消毒处理,避免污染。

3.2 核酸提取方法应根据不同样品选择不同的方法,如组织样品可采用酚-氯仿法或商用核酸提取试剂盒,血液样品可采用商用血液DNA提取试剂盒等。

4. RT-PCR反应

4.1 RT-PCR反应应在无菌条件下进行,避免污染。

4.2 RT-PCR反应体系应根据试剂盒说明书或自行设计,反应条件应根据实验室条件进行优化。

5. 结果判定

5.1 结果判定应根据RT-PCR反应结果,判断样品是否为鹅的禽副粘病毒病或高致病性禽流感(H5亚型)。

5.2 结果判定应根据标准曲线或内参基因的Ct值,判断样品是否为阳性或阴性。

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