DB44/T 2220-2019
柑橘黄龙病菌数字PCR检测
发布时间:2019-12-26 实施时间:2020-03-26
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柑橘黄龙病是由柑橘黄龙病菌引起的一种严重的病害,其主要危害柑橘、柚子等柑橘类作物。为了及时、准确地检测柑橘黄龙病菌,保障柑橘类作物的生产安全,制定了本标准。
1.范围
本标准适用于柑橘黄龙病菌数字PCR检测方法。
2.样品处理
2.1 样品采集
样品采集应在病害初期进行,采集病叶、病枝、病果等部位,避免采集健康部位。
2.2 样品保存
样品采集后应立即送至实验室进行处理,如不能立即处理,应在4℃下保存,不超过24小时。
3.DNA提取
3.1 样品处理
样品处理前应先将样品表面的污染物清除干净,然后将样品切碎,加入适量的提取液,进行振荡。
3.2 DNA提取
DNA提取应按照试剂盒说明书进行,提取后的DNA应在-20℃下保存。
4.PCR反应体系
PCR反应体系应包括模板DNA、引物、酶、缓冲液、dNTPs等组分,具体比例应按照试剂盒说明书进行。
5.PCR程序
PCR程序应按照试剂盒说明书进行,包括预变性、变性、退火、延伸等步骤。
6.结果判定
PCR反应结束后,应根据试剂盒说明书进行结果判定,判定结果应为阳性或阴性。
相关标准:
GB/T 28001-2011 质量管理体系
GB/T 19001-2016 质量管理体系
GB/T 24001-2016 环境管理体系
GB/T 28004-2018 食品安全管理体系
GB/T 28002-2011 职业健康安全管理体系