DB43/T 702-2012
饲料中氟喹诺酮的测定 高效液相色谱法
发布时间:2012-07-24 实施时间:2012-12-10


一、范围
本标准规定了饲料中氟喹诺酮的测定方法,采用高效液相色谱法进行测定。该方法适用于饲料中氟喹诺酮的测定。

二、仪器和设备
1. 高效液相色谱仪:具有紫外检测器和荧光检测器。
2. 色谱柱:C18色谱柱,5μm,4.6mm×250mm。
3. 称量仪:精度为0.1mg。
4. 超声波清洗仪:功率为100W。
5. 恒温水浴器:温度范围为20℃~40℃。
6. 离心机:最高转速为12000r/min。

三、试剂和材料
1. 氟喹诺酮标准品:纯度≥98%。
2. 甲醇:色谱纯。
3. 乙腈:色谱纯。
4. 磷酸二氢钾:分析纯。
5. 磷酸氢二钠:分析纯。
6. 水:离子交换纯。
7. 饲料样品:经过研磨、筛选、混合后制成的样品。

四、操作步骤
1. 样品制备
取饲料样品5g,加入50mL水中,超声波清洗10min,离心10min,取上清液过滤,取1mL过滤液加入10mL甲醇中,超声波清洗10min,离心10min,取上清液过滤,即为样品液。
2. 标准曲线制备
取氟喹诺酮标准品0.1mg/mL的甲醇溶液,稀释成0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μg/mL的标准溶液,用甲醇稀释至10mL,即为标准曲线溶液。
3. 色谱条件
流动相:甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钾缓冲液(30:70,pH=3.0)。
流速:1.0mL/min。
柱温:30℃。
检测波长:紫外检测器为278nm,荧光检测器为λex=278nm,λem=450nm。
4. 样品测定
取样品液1mL,加入10mL甲醇中,超声波清洗10min,离心10min,取上清液过滤,取1mL过滤液加入10mL甲醇中,超声波清洗10min,离心10min,取上清液过滤,取1mL过滤液加入10mL甲醇中,即为待测液。用待测液进行色谱分析,记录峰面积。
5. 数据处理
用标准曲线计算样品中氟喹诺酮的含量。

五、结果表示
样品中氟喹诺酮的含量,以mg/kg表示。

六、质量控制
1. 标准曲线的制备和检测应符合质量控制要求。
2. 每个样品应进行两次测定,结果的相对标准偏差不得大于10%。
3. 每个批次样品应设置空白对照和加标对照,空白对照的峰面积应小于检测限,加标对照的回收率应在80%~120%之间。

相关标准:
1. GB/T 5750-2018 水质标准
2. GB/T 6682-2012 分析化学实验室通用规定
3. GB/T 13078-2017 饲料中添加剂的检验
4. GB/T 22223-2008 饲料中药物残留量的测定 高效液相色谱法
5. GB/T 22224-2008 饲料中抗生素残留量的测定 高效液相色谱法