一、范围
本标准适用于饲料中阿散酸、洛克沙胂的测定。

二、仪器设备
1. 高效液相色谱仪：采用二元高压梯度泵、自动进样器、紫外检测器等组成。
2. 色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
3. 称量仪：精度为0.1mg的电子天平。
4. 超声波清洗仪：功率为100W，频率为40kHz。
5. 筛网：孔径为0.45μm的微孔过滤膜。

三、试剂和材料
1. 阿散酸、洛克沙胂标准品：纯度不低于98%。
2. 甲醇：色谱纯。
3. 磷酸二氢钾：分析纯。
4. 磷酸氢二钠：分析纯。
5. 离子交换水：电阻率不低于18.2MΩ.cm。
6. 饲料样品。

四、操作步骤
1. 样品制备
取饲料样品1g，加入50mL离子交换水中，用超声波清洗仪清洗10min，离心10min，取上清液过滤，取滤液10mL，加入10mL甲醇，振荡均匀，离心10min，取上清液过滤，即为样品溶液。
2. 标准曲线制备
取阿散酸、洛克沙胂标准品各适量，分别加入10mL甲醇中，制成1mg/mL的标准溶液。取不同浓度的标准溶液，分别加入10mL甲醇中，制成不同浓度的标准曲线溶液。
3. 色谱条件
流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（体积比为70:30），pH值为2.5。
流速：1.0mL/min。
检测波长：阿散酸为210nm，洛克沙胂为240nm。
进样量：20μL。
柱温：25℃。
4. 色谱分析
将样品溶液和标准曲线溶液分别进样，进行色谱分析。根据标准曲线计算样品中阿散酸、洛克沙胂的含量。

五、结果计算
样品中阿散酸、洛克沙胂的含量分别按下式计算：
C=（A×V×D）/（ε×m）
其中，C为样品中阿散酸、洛克沙胂的含量（mg/kg）；
A为峰面积；
V为进样量（mL）；
D为稀释倍数；
ε为阿散酸、洛克沙胂的摩尔吸光系数；
m为样品质量（g）。

六、质量控制
1. 标准曲线的线性范围：阿散酸0.05~5.0mg/L，洛克沙胂0.02~2.0mg/L。
2. 标准曲线的相关系数：阿散酸r≥0.999，洛克沙胂r≥0.999。
3. 样品的加标回收率：阿散酸为80%~120%，洛克沙胂为70%~130%。
4. 样品的检出限：阿散酸为0.01mg/kg，洛克沙胂为0.005mg/kg。

七、报告格式
报告中应包括样品名称、样品编号、检测项目、检测结果、检测方法、检测日期、检测人员等信息。

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