一、范围
本标准适用于渔业水体中氯硝柳胺的测定。

二、仪器设备和试剂
1. 液相色谱仪：具有紫外检测器和反向相色谱柱。
2. 色谱柱：C18色谱柱，5μm，4.6mm×250mm。
3. 称量仪：精度为0.1mg。
4. 量筒：100mL。
5. 移液管：1mL、10mL。
6. 滤膜：0.22μm。
7. 甲醇：色谱纯。
8. 乙腈：色谱纯。
9. 磷酸二氢钾：分析纯。
10. 磷酸氢二钠：分析纯。
11. 氯硝柳胺标准品：纯度≥98%。
12. 氯硝柳胺质量浓度标准溶液：1mg/L。

三、样品处理
1. 取样：取样时应避免污染，避免阳光直射。
2. 过滤：将样品过滤，滤膜孔径为0.22μm。
3. 调整pH值：将样品pH值调整至7.0±0.2。
4. 浓缩：将100mL样品浓缩至10mL。

四、操作步骤
1. 标准曲线的制备
(1) 取氯硝柳胺标准品0.1mg，加入10mL甲醇中，摇匀，得到100μg/mL的标准溶液。
(2) 取100μL标准溶液，加入10mL甲醇中，得到10μg/mL的标准溶液。
(3) 取10μL、20μL、40μL、60μL、80μL、100μL标准溶液，加入10mL甲醇中，得到1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、6μg/mL、8μg/mL、10μg/mL的标准溶液。
(4) 将标准溶液注入液相色谱仪中，测定各浓度下的峰面积，绘制标准曲线。

2. 样品的测定
(1) 取10mL浓缩后的样品，加入10mL甲醇中，摇匀。
(2) 取1mL样品溶液，加入10mL甲醇中，摇匀，得到100μg/mL的样品溶液。
(3) 取1mL样品溶液，加入10mL甲醇中，摇匀，得到10μg/mL的样品溶液。
(4) 将样品溶液注入液相色谱仪中，测定峰面积。
(5) 根据标准曲线计算样品中氯硝柳胺的质量浓度。

五、结果计算
样品中氯硝柳胺的质量浓度（mg/L）=样品中氯硝柳胺的峰面积/标准曲线斜率

六、质量控制
1. 标准曲线的制备应每次测定前制备。
2. 标准品的纯度应≥98%。
3. 标准品的保存应避光、干燥、密封。
4. 样品的取样、保存、处理应避光、避热、避冷、避震动。
5. 每个样品应测定3次，计算平均值。

相关标准
GB/T 5009.156-2016 食品中氯硝柳胺的测定 液相色谱法
GB/T 5750-2006 地表水质量标准
GB 11607-1989 水质采样方法
GB/T 5751-2006 地下水质量标准
GB/T 14848-2017 水质标准采样方法