黄瓜是一种重要的蔬菜作物，但常常受到病毒病的侵害，导致产量和品质下降。因此，研究黄瓜的抗病毒病抗性具有重要意义。本标准介绍了一种侵染性克隆法，用于鉴定黄瓜的抗病毒病抗性。

1. 材料和设备
1.1 材料
- 黄瓜种子
- 病毒病毒株
- 病毒病毒血清
- PBS缓冲液
- 70%乙醇
- 无菌离心管
- 无菌移液器
- 离心机
- PCR仪

1.2 设备
- 生物安全柜
- 培养箱
- PCR仪

2. 方法步骤
2.1 病毒病毒株的制备
将病毒病毒株接种在适宜的寄主植物上，培养至病毒病症状明显，收集病毒病组织，制备病毒病毒株。

2.2 病毒病毒血清的制备
将病毒病毒株接种在适宜的寄主植物上，培养至病毒病症状明显，收集病毒病组织，制备病毒病毒血清。

2.3 黄瓜种子的处理
将黄瓜种子在70%乙醇中消毒，用PBS缓冲液洗涤3次，然后在无菌条件下萌发。

2.4 病毒病毒株的接种
将病毒病毒株接种在黄瓜幼苗上，接种后将黄瓜幼苗移入培养箱中，保持适宜的温度和湿度，观察病毒病症状。

2.5 病毒病毒血清的检测
将病毒病毒血清与黄瓜幼苗叶片进行反应，观察反应结果。

3. 结果判定
3.1 阳性对照
使用已知的抗病毒病抗性的黄瓜品种作为阳性对照，观察其病毒病症状。

3.2 结果判定
观察接种的黄瓜幼苗是否出现病毒病症状，同时进行病毒病毒血清检测，判断黄瓜幼苗是否感染了病毒病毒株。

4. 质量控制
4.1 实验室环境
实验室应具备生物安全条件，保证实验过程的安全性。

4.2 材料和设备
使用的材料和设备应符合相关标准，保证实验结果的准确性和可靠性。

4.3 实验人员
实验人员应具备相关的专业知识和技能，保证实验操作的正确性和规范性。

相关标准
- GB/T 16180-2019 蔬菜种子质量
- GB/T 16181-2019 蔬菜种子检验方法
- GB/T 16182-2019 蔬菜种子包装、标志、运输和贮存
- GB/T 16183-2019 蔬菜种子生产管理规范
- GB/T 16184-2019 蔬菜种子生产技术规范