DB43/T 2486-2022
灰毡毛忍冬组织培养育苗技术规程
发布时间:2022-12-09 实施时间:2023-03-09


一、范围
本标准适用于灰毡毛忍冬的组织培养育苗技术。

二、术语和定义
2.1 灰毡毛忍冬:学名为Lonicera hypoglauca Miq.,属忍冬科忍冬属,是一种常绿灌木,分布于中国东北、华北、西北和华东地区。
2.2 组织培养:指将植物的一部分或全部组织在无菌条件下培养,以获得大量的同质化植株或次生代谢产物。
2.3 育苗:指将种子或组织培养的植物在适宜的环境条件下培育,使其生长发育良好,为后续的移栽或繁殖做好准备。

三、技术要求
3.1 培养基的配制
3.1.1 培养基的配制应符合组织培养的要求,具体配方见表1。
3.1.2 培养基的pH值应在5.5-6.5之间。
3.1.3 培养基的无菌性应符合国家标准。

3.2 组织的处理
3.2.1 采集灰毡毛忍冬的茎尖、叶片等组织,去除杂质,用70%的乙醇消毒3-5分钟,再用无菌蒸馏水冲洗3次。
3.2.2 将处理好的组织切成小块,大小约为0.5cm×0.5cm,用无菌镊子夹取放入培养基中。

3.3 培养条件
3.3.1 培养室的温度应控制在20-25℃之间,相对湿度应在50%-70%之间。
3.3.2 光照条件应为12小时光照和12小时黑暗。
3.3.3 培养基的更换应根据需要进行,一般为每3-4周更换一次。

3.4 质量控制
3.4.1 培养基的无菌性应每周检查一次,发现有菌落或霉菌生长应及时更换培养基。
3.4.2 组织的生长情况应每周记录一次,发现有异常情况应及时处理。

四、检验方法
4.1 培养基的无菌性检验
4.1.1 取一定量的培养基,加入适量的琼脂,煮沸至琼脂完全溶解,冷却至50℃左右。
4.1.2 将处理好的组织放入琼脂中,摇晃均匀,放置于无菌条件下培养3-5天,观察是否有菌落或霉菌生长。

4.2 组织的生长情况检验
4.2.1 观察组织的生长情况,包括生长速度、颜色、形态等。
4.2.2 如发现组织生长异常,应及时处理,如更换培养基、调整培养条件等。

五、包装、运输和贮存
5.1 包装
5.1.1 组织培养的灰毡毛忍冬应放置于无菌培养瓶中,每瓶放置适量的培养基和组织块。
5.1.2 包装应符合国家标准。

5.2 运输
5.2.1 运输应在无菌条件下进行,避免震动和碰撞。
5.2.2 运输过程中应避免高温和低温环境。

5.3 贮存
5.3.1 组织培养的灰毡毛忍冬应存放于无菌条件下的培养室中。
5.3.2 贮存温度应控制在20-25℃之间,相对湿度应在50%-70%之间。

相关标准
GB/T 16157-2012 植物组织培养通用技术要求
GB/T 16158-2012 植物种子育苗技术要求
GB/T 16159-2012 植物组织培养育苗技术要求
GB/T 16160-2012 植物组织培养育苗质量检验方法
GB/T 16161-2012 植物种子育苗质量检验方法