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双孢蘑菇是一种重要的食用菌，其菌种的纯度和活力对于生产和质量的影响非常大。为了保证双孢蘑菇菌种的质量和稳定性，需要进行菌种提纯和复壮。本标准就是为了规范双孢蘑菇菌种提纯复壮的技术要求、操作步骤、质量控制和检验方法等内容。

一、适用范围
本标准适用于双孢蘑菇菌种提纯复壮的技术要求、操作步骤、质量控制和检验方法等内容。

二、术语和定义
2.1 双孢蘑菇：双孢蘑菇是一种食用菌，属于真菌门、担子菌纲、伞菌目、蘑菇科、双孢蘑菇属。
2.2 菌种提纯：指从混合菌群中分离出单一的、纯种的双孢蘑菇菌株。
2.3 复壮技术：指将低活力的双孢蘑菇菌株经过一系列的处理，使其恢复活力和生长能力的技术。
2.4 菌种活力：指双孢蘑菇菌株的生长速度、菌丝生长情况、子实体形态等指标。
2.5 菌种纯度：指双孢蘑菇菌株中杂菌的数量和种类。

三、技术要求
3.1 菌种提纯
（1）选择健康、生长良好的双孢蘑菇子实体，取其菌柄部分进行分离。
（2）采用无菌技术，将分离出的菌丝接种到无菌培养基上，进行单株培养。
（3）通过形态学和生理生化特性鉴定，筛选出纯种的双孢蘑菇菌株。
（4）将纯种菌株进行保存和管理，保证其质量和稳定性。

3.2 复壮技术
（1）选择活力低下的双孢蘑菇菌株，进行复壮处理。
（2）复壮处理包括菌丝接种、营养液调配、温度控制等步骤。
（3）复壮后的菌株应具有较高的活力和生长能力。

四、质量控制
4.1 菌种纯度检验
（1）采用无菌技术，将菌株接种到含有适宜营养物质的培养基上。
（2）观察培养基上的菌落形态和生长情况，判断是否存在杂菌。
（3）通过形态学和生理生化特性鉴定，确定杂菌种类。

4.2 菌种活力检验
（1）采用无菌技术，将菌株接种到含有适宜营养物质的培养基上。
（2）观察菌株的生长速度、菌丝生长情况、子实体形态等指标，评估菌株的活力。

五、检验方法
5.1 菌种纯度检验方法
（1）无菌技术
（2）形态学和生理生化特性鉴定

5.2 菌种活力检验方法
（1）无菌技术
（2）生长速度、菌丝生长情况、子实体形态等指标的观察和评估

相关标准：
GB/T 18920-2002 食用菌菌种质量检验方法
GB/T 18921-2002 食用菌菌种保存方法
GB/T 18922-2002 食用菌菌种管理规范
GB/T 18923-2002 食用菌菌种交换规范
GB/T 18924-2002 食用菌菌种命名规范