猪流感病毒是一种由猪流感病毒引起的疾病,主要表现为发热、咳嗽、流涕、喉咙痛、肌肉疼痛等症状。猪流感病毒主要分为H1、H3、N1、N2四个亚型,其中H1亚型是最为常见的亚型之一。
酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常用的抗体检测方法,可以用于检测猪流感病毒(H1亚型)的抗体水平。本标准规定了猪流感病毒(H1亚型)酶联免疫吸附试验抗体检测方法,具体步骤如下:
1. 样品处理
将待测血清样品离心,去除悬浮的颗粒物,然后将血清稀释至适当浓度。
2. 酶标板涂覆
将猪流感病毒(H1亚型)抗原溶液加入酶标板孔中,然后在4℃下保存过夜。
3. 洗涤
将酶标板孔中的液体倒出,然后用洗涤缓冲液洗涤酶标板孔,重复3次。
4. 孔内阻断
将孔内阻断液加入酶标板孔中,然后在37℃下孵育1小时。
5. 加样
将样品加入酶标板孔中,然后在37℃下孵育1小时。
6. 洗涤
将酶标板孔中的液体倒出,然后用洗涤缓冲液洗涤酶标板孔,重复3次。
7. 加二抗
将辣根过氧化物酶标记的抗猪IgG二抗加入酶标板孔中,然后在37℃下孵育1小时。
8. 洗涤
将酶标板孔中的液体倒出,然后用洗涤缓冲液洗涤酶标板孔,重复3次。
9. 加底物
将底物加入酶标板孔中,然后在37℃下孵育30分钟。
10. 终止反应
加入终止液终止反应。
11. 读板
用酶标仪读取吸光度值。
本标准适用于猪流感病毒(H1亚型)抗体检测,具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点。
相关标准
GB/T 22470-2008 猪流感病毒检测方法
GB/T 22471-2008 猪流感病毒灭活疫苗检测方法
GB/T 22472-2008 猪流感病毒灭活疫苗疫效测定方法
GB/T 22473-2008 猪流感病毒灭活疫苗生产质量控制方法
GB/T 22474-2008 猪流感病毒灭活疫苗生产质量控制规范