猪胸膜肺炎放线杆菌是一种常见的猪病原菌，能引起猪胸膜肺炎等疾病。为了及时发现和控制猪胸膜肺炎放线杆菌的感染，需要对其进行检测。本标准介绍了一种基于ELISA技术的猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIV抗体检测方法。

1. 范围
本标准适用于猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIV抗体的检测。

2. 原理
本方法采用间接ELISA法，利用ApxIV抗原包被在微孔板上，检测猪血清中的ApxIV抗体。

3. 试剂和仪器
3.1 试剂
- ApxIV抗原包被液
- 磷酸盐缓冲液
- 0.05%Tween-20溶液
- 羊抗猪IgG-HRP
- TMB底物液
- 停止液
- 磷酸盐缓冲液-BSA溶液
- 纯化水
3.2 仪器
- 微孔板洗涤器
- 微孔板读板仪

4. 操作步骤
4.1 样品处理
将猪血清离心去除悬浮物，取上清作为样品。

4.2 微孔板包被
将ApxIV抗原包被液加入微孔板中，孵育过夜，然后用磷酸盐缓冲液洗涤。

4.3 样品加样
将样品加入微孔板中，孵育1小时，然后用0.05%Tween-20溶液洗涤。

4.4 加入检测抗体
将羊抗猪IgG-HRP加入微孔板中，孵育1小时，然后用0.05%Tween-20溶液洗涤。

4.5 加入底物液
将TMB底物液加入微孔板中，孵育15分钟，然后加入停止液停止反应。

4.6 读板
用微孔板读板仪读取吸光度值。

5. 结果判定
根据吸光度值计算样品的抗体滴度。

6. 结论
本方法可用于猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIV抗体的检测。

相关标准
- GB/T 22470-2008 猪胸膜肺炎放线杆菌检验方法
- GB/T 22471-2008 猪胸膜肺炎放线杆菌毒素检验方法
- GB/T 22472-2008 猪胸膜肺炎放线杆菌血清学检验方法
- GB/T 22473-2008 猪胸膜肺炎放线杆菌分子生物学检验方法
- GB/T 22474-2008 猪胸膜肺炎放线杆菌药敏试验方法