奶牛粪污中的药物残留是一种常见的环境污染问题，对人类健康和环境安全造成潜在威胁。因此，对奶牛粪污中药物残留的测定具有重要意义。本标准旨在规定奶牛粪污中5种磺胺类药物的测定方法，采用高效液相色谱法进行分析。

1.范围
本标准适用于奶牛粪污中磺胺类药物残留的测定。

2.仪器和试剂
2.1 仪器
本标准所需的仪器设备包括高效液相色谱仪、色谱柱、进样器、检测器等。
2.2 试剂
本标准所需的试剂包括甲醇、乙腈、水、磷酸二氢钾、三氯乙酸、氨水等。

3.样品处理
3.1 样品的采集
样品采集应在奶牛排泄后立即进行，避免样品中药物残留的降解和分解。
3.2 样品的制备
将样品加入适量的甲醇中，超声处理30min，离心后取上清液，过滤后即可进行分析。

4.色谱条件
4.1 色谱柱
采用C18色谱柱，柱长250mm，内径4.6mm，颗粒度5μm。
4.2 流动相
甲醇-水（含0.1%磷酸二氢钾）（30:70，v/v）。
4.3 流速
1.0mL/min。
4.4 检测波长
磺胺嘧啶：254nm；
磺胺甲基异噁唑：270nm；
磺胺二甲嘧啶：254nm；
磺胺噻唑：254nm；
磺胺乙磺嘧啶：254nm。

5.方法检定
5.1 标准曲线的制备
取5个不同浓度的标准品，分别加入适量的甲醇中制备成不同浓度的标准溶液，分别进行测定，绘制标准曲线。
5.2 样品的测定
将样品加入进样器中，进行高效液相色谱分析，根据标准曲线计算出样品中药物残留的浓度。

6.结果的计算
根据标准曲线计算出样品中药物残留的浓度，按照公式计算出样品中药物残留的含量。

7.质量控制
7.1 空白对照
在样品制备和分析过程中，应设置空白对照，以检测仪器和试剂的污染情况。
7.2 标准品对照
在每批样品分析前，应进行标准品对照，以检测仪器和试剂的稳定性和准确性。

相关标准
GB/T 5009.199-2017 食品中磺胺类药物残留量的测定 高效液相色谱法
GB/T 5009.156-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.155-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 液相色谱法
GB/T 5009.154-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 毛细管电泳法
GB/T 5009.153-2016 食品中磺胺类药物残留量的测定 高效液相色谱-串联质谱法