一、范围
本标准适用于禽蛋中氯霉素类药物残留量的测定。

二、仪器设备和试剂
2.1 仪器设备
液相色谱仪：具有紫外检测器和荧光检测器，分析柱为C18柱或C8柱。
电子天平：分度值为0.1mg。
超声波清洗器：功率为100W，频率为40kHz。
离心机：最高转速为10000r/min。
移液器：1mL、5mL、10mL。
注射器：1mL。
微孔过滤器：0.22μm。
2.2 试剂
氯霉素、氯霉素苯丙胺、氯霉素磷酸盐、氯霉素荧光素、氯霉素荧光素苯丙胺、氯霉素荧光素磷酸盐标准品：纯度≥98%。
甲醇：色谱纯。
乙腈：色谱纯。
磷酸二氢钾：分析纯。
乙酸钠：分析纯。
乙酸：分析纯。
水：超纯水或蒸馏水。

三、样品的处理
3.1 样品的准备
将禽蛋样品取适量，打破，混合均匀，取样5g，加入50mL甲醇中，超声波清洗10min，离心10min，取上清液过滤，取1mL过滤液加入10mL离心管中，加入1mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液过滤，即为样品液。
3.2 样品的稀释
取样品液1mL，加入10mL离心管中，加入1mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液过滤，即为稀释液。

四、操作步骤
4.1 标准曲线的绘制
取氯霉素、氯霉素苯丙胺、氯霉素磷酸盐、氯霉素荧光素、氯霉素荧光素苯丙胺、氯霉素荧光素磷酸盐标准品各适量，加入10mL离心管中，加入1mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液过滤，即为标准液。分别取标准液1mL、2mL、4mL、6mL、8mL，加入10mL离心管中，加入1mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液过滤，即为标准曲线的各浓度点。
4.2 样品的测定
取稀释液1mL，加入10mL离心管中，加入1mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液过滤，注入液相色谱仪中，按照液相色谱仪的操作方法进行测定。

五、结果计算
用标准曲线法计算样品中氯霉素类药物的含量。

六、质量控制
6.1 标准品的制备
将氯霉素、氯霉素苯丙胺、氯霉素磷酸盐、氯霉素荧光素、氯霉素荧光素苯丙胺、氯霉素荧光素磷酸盐标准品各适量，加入10mL离心管中，加入1mL乙腈，振荡混合，离心10min，取上清液过滤，即为标准液。
6.2 空白对照
取同样的样品处理方法，但不加入标准品，即为空白对照。
6.3 精密度和准确度
在同一天内，重复测定6次，计算相对标准偏差（RSD）；在不同天内，重复测定6次，计算RSD。
6.4 检出限和定量限
检出限和定量限的计算方法见附录A。

相关标准
GB/T 5009.199-2017 食品中氯霉素类药物残留量的测定 高效液相色谱法
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GB/T 5009.203-2017 食品中氯霉素类药物残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
GB/T 5009.204-2017 食品中氯霉素类药物残留量的测定 液相色谱-荧光检测法
GB/T 5009.205-2017 食品中氯霉素类药物残留量的测定 液相色谱-紫外检测法