硫酸粘杆菌素是一种广泛应用于畜禽饲料中的抗生素，能够有效预防和治疗畜禽的疾病。然而，过量使用硫酸粘杆菌素会对人体健康产生不良影响，因此需要对混合型饲料添加剂中的硫酸粘杆菌素进行测定，以确保畜禽饲料的安全性。

本标准采用高效液相色谱法进行测定，具体步骤如下：

1. 样品的制备

将混合型饲料添加剂样品取1g，加入50mL甲醇中，超声处理10min，离心10min，取上清液过滤，取10mL过滤液加入10mL水中，调节pH至7.0，用0.22μm滤膜过滤，即为待测样品。

2. 标准曲线的制备

取硫酸粘杆菌素标准品0.1mg/mL，分别取0.1mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL，加入10mL水中，调节pH至7.0，用0.22μm滤膜过滤，即为标准曲线的浓度。

3. 色谱条件

色谱柱：C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）

流动相：甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液（30:70）

流速：1.0mL/min

检测波长：280nm

柱温：30℃

4. 样品的测定

取10μL标准曲线和待测样品，注入色谱柱中进行分离，记录峰面积，根据标准曲线计算出硫酸粘杆菌素的含量。

本标准的测定方法简单、准确、可靠，适用于混合型饲料添加剂中硫酸粘杆菌素的测定。

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