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牡蛎疱疹病毒І型是一种常见的水生动物病原体，能够引起牡蛎的疱疹病。为了保障水产品的安全，需要对牡蛎疱疹病毒І型进行检测。本标准规定了牡蛎疱疹病毒І型检测技术的巢式PCR法，以确保检测结果的准确性和可靠性。

1.范围
本标准适用于牡蛎疱疹病毒І型的检测，包括样品采集、提取、扩增、检测和结果判定等方面的要求。

2.术语和定义
2.1 牡蛎疱疹病毒І型
指引起牡蛎疱疹病的病毒，属于疱疹病毒科。

2.2 巢式PCR法
指在PCR反应中，利用两对特异性引物，进行两次PCR扩增，以提高PCR反应的特异性和灵敏度。

3.样品采集和处理
3.1 样品采集
采集牡蛎组织样品，如肝、鳃、肌肉等。

3.2 样品处理
将样品加入离心管中，加入适量的PBS缓冲液，离心沉淀，去除上清液，加入适量的消化液，消化后离心沉淀，去除上清液，加入适量的提取液，进行核酸提取。

4.巢式PCR扩增
4.1 反应体系
反应体系包括模板DNA、引物、酶、缓冲液和水等。

4.2 巢式PCR程序
第一次PCR扩增：95℃预变性5min，95℃变性30s，55℃退火30s，72℃延伸1min，共35个循环。
第二次PCR扩增：95℃预变性5min，95℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸1min，共35个循环。

5.结果判定
5.1 结果判定标准
根据扩增产物的大小和特异性，判断是否为牡蛎疱疹病毒І型。

5.2 结果判定方法
利用凝胶电泳或其他方法，观察扩增产物的大小和特异性，判断是否为牡蛎疱疹病毒І型。

相关标准：
GB/T 4789.30-2016 食品微生物学检验 沙门氏菌检验
GB/T 4789.31-2016 食品微生物学检验 肠道致病菌检验
GB/T 4789.32-2016 食品微生物学检验 耐热性大肠杆菌检验
GB/T 4789.33-2016 食品微生物学检验 耐酸性细菌检验
GB/T 4789.34-2016 食品微生物学检验 耐盐性细菌检验