DB37/T 3374-2018
玉米粗缩病病原检测技术规程
发布时间:2018-07-19 实施时间:2018-08-19
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玉米粗缩病是由玉米粗缩病毒引起的一种病害,主要危害玉米、高粱等作物。为了及时发现和控制玉米粗缩病的发生,需要对其病原进行检测。本标准就是为了规范玉米粗缩病病原检测的技术要求、方法和步骤。
1.技术要求
1.1 检测方法应具有高灵敏度、高特异性和高稳定性。
1.2 检测方法应能够检测出玉米粗缩病毒的所有亚型。
1.3 检测方法应能够检测出不同来源、不同地区、不同品种的玉米粗缩病毒。
1.4 检测方法应能够检测出不同部位、不同生长期的玉米粗缩病毒。
2.方法和步骤
2.1 样品采集
2.1.1 样品应采集自疑似或确诊的玉米粗缩病病株。
2.1.2 样品应采集新鲜、完整、无病变的组织,如叶片、茎、花、果实等。
2.1.3 样品应在采集后立即送至实验室进行检测。
2.2 样品处理
2.2.1 样品应在无菌条件下进行处理。
2.2.2 样品应先进行粗提取,再进行纯化。
2.2.3 样品纯化后,应进行核酸提取。
2.3 PCR扩增
2.3.1 PCR扩增应选择适当的引物和探针。
2.3.2 PCR扩增应在适当的温度、时间和循环数下进行。
2.3.3 PCR扩增产物应进行凝胶电泳检测。
2.4 结果判定
2.4.1 根据PCR扩增产物的大小和凝胶电泳图谱,判断是否存在玉米粗缩病毒。
2.4.2 根据PCR扩增产物的序列,进行物种鉴定和亚型鉴定。
相关标准:
GB/T 28496-2012 植物病毒检疫技术规程
GB/T 28497-2012 植物病毒检测技术规程
GB/T 28498-2012 植物病毒检测方法评价规程
GB/T 28499-2012 植物病毒检测质量控制规程
GB/T 28500-2012 植物病毒检测结果判定规程